应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 重组质粒，摇菌提取质粒后，如何测序？
61/1返回列表
查看: 6162  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

永远一片天

新虫 (正式写手)

[求助] 重组质粒，摇菌提取质粒后，如何测序？ 已有4人参与

重组质粒，摇菌提取质粒后，如何测序？用的是通用引物吗？提取质粒后还要不要再用特异性引物大量扩增产物？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-02-10 19:15:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Lau_Kimura

铁虫 (正式写手)
★ ★ ★
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-02-11 15:19:51
你用的是什么质粒？是不是用什么试剂盒的？——不知道质粒（空载体）名称，谈何通用引物？

质粒提取后，消化RNA，取2微升跑电泳。泳带质量好的话，即可送去测序，当然还要说明用什么引物（自带，或哪种通用引物）。
赞一下 回复此楼
2楼2014-02-10 19:26:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

baihaer

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-02-11 15:19:55
提取完质粒后直接找公司给你测序就可以，添一张公司（如华大、英潍捷基等）的测序表，因为质粒是你重组的所以目的基因长度、载体名称什么的你应该都知道，填完表连同质粒（一般去10μl足够）送公司测序。你的载体如果比较大众，就添通用引物不用自备，因为大部分载体引物公司都有。
赞一下(1人) 回复此楼
没有SB的事，只有SB的人
3楼2014-02-11 09:19:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiaolong11a

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-12 13:43:43
提取质粒后，跑个胶，看看有没有提出来，然后送给公司测序，至于引物，看你目的了，如果有插入片段且只测插入片段的话，就给插入片段的引物，如果测通，就注明通用引物，当然要注明载体名称
赞一下 回复此楼
多情总被无情扰。。。愁
4楼2014-02-12 11:24:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你先PCR扩一下确定正确的质粒，再根据你所要目的基因片段的位置用引物测序，若通用引物合适就用通用引物就可以。
赞一下 回复此楼
hehe
5楼2014-02-12 20:52:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tmoonday

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
确定是哪种载体，然后用用这种载体的通用引物测序。当然也可以用自己基因的引物，但是如果插入的不是你要的片段，就会测不出来。
赞一下 回复此楼
等一份缘分
6楼2014-02-13 10:40:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 永远一片天 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭