应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求手抽质粒降解原因
81/1返回列表
查看: 3177  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

liuyu_sdili

木虫 (正式写手)

[求助] 求手抽质粒降解原因

手抽质粒，昨天因为马上使用，为了不影响酶切效率，用去离子水保存，今天电泳后发现降解很严重，网上有人说是DNA酶降解的作用。今天抽提时特地做了对照，第一组用去离子水保存，第二组用加了RNA酶的TE保存，其余步骤完全相同，发现第一组降解仍然严重，第二组没有降解，我推测前面降解是因为DNA酶的作用，大家分析一下是不是我的去离子水出了问题，还是其他原因？？？多谢~~~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-02-04 17:35:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

南极仙翁

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
liuyu_sdili(金币+1): 恩，再重新灭菌看看~~~ 2012-02-05 09:31:32
liuyu_sdili(金币+1): ★有帮助 谢谢~~ 2012-02-05 09:32:06
西瓜(金币+2): 欢迎新朋友参与交流！ 2012-02-05 12:16:06
很有可能是你的去离子水有问题，你最好用新配置的去离子水
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2012-02-05 08:54:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

703600973

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
liuyu_sdili(金币+1): ★有帮助 是的，因为条带呈现比较均匀弥散状，如果有RNA的话下面会很亮~~~ 2012-02-05 10:31:25
西瓜(金币+1): 鼓励交流！质粒很好提的，看情况再考虑试剂盒吧。 2012-02-05 12:19:05
你确定前面讲解的是DNA而不是没提净的RNA，推荐用试剂盒
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2012-02-05 10:06:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiaxinfish

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
liuyu_sdili(金币+2): ★★★很有帮助 好的，我试试看 2012-02-05 15:43:01
如果是手提质粒的话，应该是第一组 的质粒 含大量RNA，所以感觉是降解一样，其实如果你跑完电泳后发现有smear，然后在剩下的质粒里加RNase，消化后再跑电泳，就会发现其实质粒还在，而且基本没降解。我也是手提质粒的，半年内基本不会有问题，而且是4度保持的。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2012-02-05 12:59:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyhl

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by jiaxinfish at 2012-02-05 12:59:35:
如果是手提质粒的话，应该是第一组 的质粒 含大量RNA，所以感觉是降解一样，其实如果你跑完电泳后发现有smear，然后在剩下的质粒里加RNase，消化后再跑电泳，就会发现其实质粒还在，而且基本没降解。我也是手提质 ...

同意楼上意见，应该是不会象楼主说的那样降解那么厉害的，请仔细判断你的电泳结果，不要太着急看胶，多跑一会！
赞一下 回复此楼
5楼2012-02-05 13:23:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)
同意为RNA污染（RNA没有去除干净）的说法。
大肠杆菌没有那么多的DNase来降解那么稳定的质粒DNA。
赞一下 回复此楼
伟大航线....
6楼2012-02-06 08:48:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

加内特

金虫 (正式写手)
顶一个，长见识了
回复此楼
少壮不努力，老大徒伤悲！
7楼2012-02-06 09:22:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuyu_sdili

木虫 (正式写手)
引用回帖:
楼: Originally posted by jiaxinfish at 2012-02-05 12:59:35:
如果是手提质粒的话，应该是第一组 的质粒 含大量RNA，所以感觉是降解一样，其实如果你跑完电泳后发现有smear，然后在剩下的质粒里加RNase，消化后再跑电泳，就会发现其实质粒还在，而且基本没降解。我也是手提质 ...

原因找出来了，其一是去离子水溶解后没有混匀，上样时只取了上层，所以带很浅，去离子水木有问题，其二如同您所说，RNA太亮。谢谢指教~~~
赞一下 回复此楼
8楼2012-02-06 10:32:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liuyu_sdili 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 321求调剂 +4 大米饭！ 2026-03-15 4/200 2026-03-16 08:41 by Linda Hu
[考研] 311求调剂 +6 冬十三 2026-03-15 6/300 2026-03-16 08:00 by wang_dand
[考研] 0703化学调剂，求各位老师收留 +7 秋有木北 2026-03-14 7/350 2026-03-15 17:30 by 小物理化学
[基金申请] 国自科面上基金字体 +4 iwuli 2026-03-12 5/250 2026-03-15 17:07 by 风云无泪
[考研] 0856专硕279求调剂 +5 加油加油！? 2026-03-15 5/250 2026-03-15 11:58 by 2020015
[考研] 304求调剂 +5 小熊joy 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:07 by peike
[考研] 255求调剂 +3 李嘉慧， 2026-03-12 4/200 2026-03-14 16:58 by 有只狸奴
[考研] 一志愿哈工大材料324分求调剂 +5 闫旭东 2026-03-14 5/250 2026-03-14 14:53 by 木瓜膏
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] 求调剂 +3 清风问长安 2026-03-09 3/150 2026-03-14 02:15 by JourneyLucky
[考研] 复试调剂 +9 Copy267 2026-03-10 9/450 2026-03-13 23:45 by userper
[考研] 一志愿中科院，化学方向，295求调剂 +4 一氧二氮 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:35 by JourneyLucky
[考研] 求调剂（材料与化工327） +4 爱吃香菜啦 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:11 by JourneyLucky
[考研] 336求调剂 +6 Iuruoh 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:06 by JourneyLucky
[考研] 0856材料与化工301求调剂 +5 奕束光 2026-03-13 5/250 2026-03-13 22:00 by 星空星月
[考研] 四川大学085601材料工程专硕 初试294求调剂 +4 祝我们好在冬天 2026-03-11 4/200 2026-03-13 21:39 by peike
[考研] 【考研调剂求收留】 +3 Ceciilia 2026-03-11 3/150 2026-03-13 20:18 by JourneyLucky
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +8 困于星晨 2026-03-12 10/500 2026-03-13 15:42 by ms629
[考研] 0703一志愿211 285分求调剂 +4 ly3471z 2026-03-13 4/200 2026-03-13 13:00 by JourneyLucky
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:43 by houyaoxu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭