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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求手抽质粒降解原因
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liuyu_sdili

木虫 (正式写手)

[求助] 求手抽质粒降解原因

手抽质粒，昨天因为马上使用，为了不影响酶切效率，用去离子水保存，今天电泳后发现降解很严重，网上有人说是DNA酶降解的作用。今天抽提时特地做了对照，第一组用去离子水保存，第二组用加了RNA酶的TE保存，其余步骤完全相同，发现第一组降解仍然严重，第二组没有降解，我推测前面降解是因为DNA酶的作用，大家分析一下是不是我的去离子水出了问题，还是其他原因？？？多谢~~~
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1楼2012-02-04 17:35:05
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liuyu_sdili

木虫 (正式写手)
引用回帖:
楼: Originally posted by jiaxinfish at 2012-02-05 12:59:35:
如果是手提质粒的话，应该是第一组 的质粒 含大量RNA，所以感觉是降解一样，其实如果你跑完电泳后发现有smear，然后在剩下的质粒里加RNase，消化后再跑电泳，就会发现其实质粒还在，而且基本没降解。我也是手提质 ...

原因找出来了，其一是去离子水溶解后没有混匀，上样时只取了上层，所以带很浅，去离子水木有问题，其二如同您所说，RNA太亮。谢谢指教~~~
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8楼2012-02-06 10:32:04
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