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求手抽质粒降解原因
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liuyu_sdili
木虫
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性别: GG
专业: 微生物生理与生物化学
[
求助
]
求手抽质粒降解原因
手抽质粒,昨天因为马上使用,为了不影响酶切效率,用去离子水保存,今天电泳后发现降解很严重,网上有人说是DNA酶降解的作用。今天抽提时特地做了对照,第一组用去离子水保存,第二组用加了RNA酶的TE保存,其余步骤完全相同,发现第一组降解仍然严重,第二组没有降解,我推测前面降解是因为DNA酶的作用,大家分析一下是不是我的去离子水出了问题,还是其他原因???多谢~~~
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1楼
2012-02-04 17:35:05
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加内特
金虫
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性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能
顶一个,长见识了
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少壮不努力,老大徒伤悲!
7楼
2012-02-06 09:22:36
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TA的回帖
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南极仙翁
新虫
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虫号: 1596100
注册: 2012-02-02
专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与,应助指数 +1
liuyu_sdili(金币+1): 恩,再重新灭菌看看~~~ 2012-02-05 09:31:32
liuyu_sdili(金币+1):
★
有帮助 谢谢~~ 2012-02-05 09:32:06
西瓜(金币+2): 欢迎新朋友参与交流! 2012-02-05 12:16:06
很有可能是你的去离子水有问题,你最好用新配置的去离子水
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2楼
2012-02-05 08:54:59
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703600973
金虫
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帖子: 114
在线: 184.8小时
虫号: 1353483
注册: 2011-07-22
性别: GG
专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
★
感谢参与,应助指数 +1
liuyu_sdili(金币+1):
★
有帮助 是的,因为条带呈现比较均匀弥散状,如果有RNA的话下面会很亮~~~ 2012-02-05 10:31:25
西瓜(金币+1): 鼓励交流!质粒很好提的,看情况再考虑试剂盒吧。 2012-02-05 12:19:05
你确定前面讲解的是DNA而不是没提净的RNA,推荐用试剂盒
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3楼
2012-02-05 10:06:34
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jiaxinfish
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在线: 310小时
虫号: 1308763
注册: 2011-05-28
专业: 生物化学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
liuyu_sdili(金币+2):
★★★
很有帮助 好的,我试试看 2012-02-05 15:43:01
如果是手提质粒的话,应该是第一组 的质粒 含大量RNA,所以感觉是降解一样,其实如果你跑完电泳后发现有smear,然后在剩下的质粒里加RNase,消化后再跑电泳,就会发现其实质粒还在,而且基本没降解。我也是手提质粒的,半年内基本不会有问题,而且是4度保持的。
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4楼
2012-02-05 12:59:35
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