| 查看: 3249 | 回复: 16 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
Atlantistree铁虫 (初入文坛)
|
[求助]
毕赤酵母表达时的杂蛋白问题 已有2人参与
|
|
|
我最近构建毕赤酵母X-33工程菌表达干扰素（20KD左右），摇瓶用BMMY表达时，蛋白很纯，没有40KD以上的蛋白，但是上罐后用基础盐离子培养基发酵后杂蛋白很多；之前还做过甘露聚糖酶（47KD左右）的表达，用基础盐离子上罐发酵时，表达蛋白很纯，没有杂蛋白。甘露聚糖酶和干扰素所用的穿梭质粒和毕赤酵母菌种完全相同，发酵工艺也相同。搞不清楚表达干扰素时，为何摇瓶表达没有杂蛋白，但是上罐后杂蛋白很多，而上罐表达甘露聚糖酶时，相同的发酵工艺，却没有杂蛋白，这种现象是由于菌体死亡造成的，还是和表达的蛋白有关？如果由于菌体自溶造成的，如何调整发酵工艺啊？求大神指点！ 附上蛋白电泳图，一张是干扰素的发酵罐表达，一张是甘露聚糖酶的发酵罐表达。  干扰素发酵罐表达.jpg  甘露聚糖酶发酵罐表达.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
271材料工程求调剂
已经有5人回复
-
281求调剂（0805）
已经有16人回复
-
304求调剂
已经有6人回复
-
材料工程专硕调剂
已经有6人回复
-
一志愿天大材料与化工（085600）总分338
已经有4人回复
-
085700资源与环境308求调剂
已经有3人回复
-
求材料调剂
已经有8人回复
-
294求调剂材料与化工专硕
已经有5人回复
-
一志愿华中科技大学，080502，354分求调剂
已经有4人回复
-
一志愿吉林大学材料学硕321求调剂
已经有6人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 毕赤酵母将目的蛋白分泌到胞外，在30度下不会失活吗？酿酒酵母胞内表达会糖基化吗？
已经有18人回复
- 低温诱导蛋白表达时用多少度合适？
已经有16人回复
- WB检测蛋白表达量时关于上样量的问题？
已经有16人回复
- 外源蛋白在毕赤酵母中不表达
已经有18人回复
- 求助----原核表达问题：实际表达的蛋白大小与预测的相差较大
已经有69人回复
- 发酵液除去大分子蛋白
已经有7人回复
- 毕赤酵母表达蛋白纯化
已经有10人回复
- 重组牛胰蛋白酶在毕赤酵母中的表达
已经有8人回复
- 请教关于酵母诱导蛋白表达的问题alpha-factor是什么东西？
已经有7人回复
- 蛋白的表达量低不稳定怎么办
已经有11人回复
- 高拷贝毕赤酵母表达出来的蛋白也是多拷贝的嘛还是自动酶切变成单体蛋白了
已经有6人回复
- 毕赤酵母表达一直不表达
已经有13人回复
- SDS PAGE 小肽？
已经有15人回复
- 毕赤表达一酶基因，跑蛋白电泳只有一条带，是不是不用纯化了呀
已经有10人回复
- 原核表达，蛋白活性问题
已经有12人回复
- 毕赤酵母表达问题求教
已经有19人回复
- 毕赤酵母表达的蛋白带的大小
已经有4人回复
- 毕赤酵母表达出蛋白但没有活性
已经有18人回复
- 毕赤酵母表达的蛋白无活性
已经有8人回复
- 大家见到过毕赤酵母表达出的外源蛋白分子量比实际分子量小吗，而且还有活性？
已经有20人回复
- 毕赤酵母转化表达
已经有13人回复
- 【求助/交流】用毕赤酵母表达载体pPIC9K表达蛋白时分子量的估计？
已经有4人回复
- 毕赤酵母怎么表达不出融合蛋白？
已经有14人回复
- 【资料】毕赤酵母表达系统操作手册
已经有362人回复
- 【求助/交流】毕赤酵母表达用培养基BMGY BMMY的详细配制方法，请赐教。
已经有14人回复
- 【求助/交流】请问毕赤酵母胞外胞外表达有酶活不蛋白，正常吗？
已经有8人回复
- 【求助/交流】非特异性酶切
已经有3人回复
- 毕赤酵母表达（总是整合不上）
已经有17人回复
Atlantistree
铁虫 (初入文坛)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 461
- 帖子: 20
- 在线: 58.1小时
- 虫号: 1490513
- 注册: 2011-11-14
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
3楼2014-01-23 08:29:01
lcat
木虫 (小有名气)
- 应助: 65 (初中生)
- 金币: 2603.1
- 散金: 5
- 红花: 4
- 帖子: 200
- 在线: 138.8小时
- 虫号: 184666
- 注册: 2006-02-14
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
2楼2014-01-22 21:21:09
reallpf
木虫 (正式写手)
- MicEPI: 21
- 应助: 150 (高中生)
- 金币: 3388.3
- 散金: 2
- 红花: 12
- 帖子: 342
- 在线: 72.6小时
- 虫号: 1892494
- 注册: 2012-07-14
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
4楼2014-01-26 12:14:39
reallpf
木虫 (正式写手)
- MicEPI: 21
- 应助: 150 (高中生)
- 金币: 3388.3
- 散金: 2
- 红花: 12
- 帖子: 342
- 在线: 72.6小时
- 虫号: 1892494
- 注册: 2012-07-14
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
5楼2014-01-26 12:17:40
