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高拷贝毕赤酵母表达出来的蛋白也是多拷贝的嘛还是自动酶切变成单体蛋白了
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大家好，我想请教一下，高拷贝毕赤酵母表达出来的蛋白也是多拷贝的嘛还是自动酶切变成单体蛋白了？ 因为我的蛋白是25KD左右但诱导出来的蛋白是66-110KD之间 不知道是不是我要的 |
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maychao123
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2楼2012-10-12 15:32:47
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maychao123
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小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-10-15 13:40:05
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我主要做的是原核表达，刚看了下你说的这两个质粒都是自带核糖体结合位点的，这样就算是在基因组上形成了高拷贝也不会造成蛋白融合的问题，应该是单体，更何况你的质粒上还带有终止区域，所以问题肯定不是因为高拷贝数造成的。http://www.dxy.cn/bbs/topic/6015595 这个不知道你看没看过，里面主要提到两个问题，一个是转化子筛选的问题，还一个是转化方法的问题，希望对你有帮助。另外你确定66-110KD之间的那个条带是诱导产物么？ |
4楼2012-10-13 17:00:51
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maychao123
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这次帮你回答问题我也学到了不少关于酵母表达系统的知识。6楼2012-10-14 21:43:19
7楼2012-10-19 08:55:49
