| 查看: 1570 | 回复: 3 | |||
[交流]
【求助/交流】非特异性酶切
|
|
各位虫友，我现在在做以毕赤酵母为表达载体分泌表达Ek酶，表达出的Ek酶量比较少，所以需要进行超滤浓缩，然后对标签蛋白进行酶切。 但是酶切后的电泳结果显示融合蛋白被切碎了，（切下的目的蛋白因分子量较小没有检测到，且目的蛋白没有活性），我们选择了23度和37度比较，结果也都是切碎了。 这种情况可能是什么原因造成的呢？有没有可能是酵母发酵过程中的代谢产物？抑或酵母自身细胞破碎导致胞内有活性的杂蛋白释放出来？想了好久还是不知道问题出在哪里，实验很长时间了都进行不下去，很是着急，请各位虫友帮忙解答！谢谢 |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有273人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 构建pBI121表达载体，目的基因与载体连接不上
已经有54人回复
- 环形质粒酶切电泳图分析求解
已经有25人回复
- 酶切酶连转化
已经有11人回复
- PCR扩增去除终止密码子
已经有4人回复
- 连接后转化子PCR出现非特异性的条带
已经有10人回复
- 连接转化后菌落PCR验证出现非特异性扩增
已经有5人回复
- 【求助/交流】单酶切酶和DNA的比例，体系大小的问题
已经有14人回复
- 【求助/交流】关于southern杂交非特异性杂交的问题
已经有8人回复
- 【求助/交流】菌液PCR鉴定阳性克隆时，总出现非特异性条带
已经有8人回复
- 【求助/交流】反向PCR的问题
已经有11人回复
lxj341401
至尊木虫 (著名写手)
- MolEPI: 58
- 应助: 388 (硕士)
- 贵宾: 0.238
- 金币: 17138.7
- 红花: 43
- 帖子: 2251
- 在线: 712.4小时
- 虫号: 111074
- 注册: 2005-11-20
- 专业: 生物化学
2楼2010-11-05 22:45:49
3楼2010-11-06 08:42:41
lxj341401
至尊木虫 (著名写手)
- MolEPI: 58
- 应助: 388 (硕士)
- 贵宾: 0.238
- 金币: 17138.7
- 红花: 43
- 帖子: 2251
- 在线: 712.4小时
- 虫号: 111074
- 注册: 2005-11-20
- 专业: 生物化学
4楼2010-11-06 09:06:20
