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jia1012428

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请问毕赤酵母胞外胞外表达有酶活不蛋白，正常吗？ 已有7人参与

请问毕赤酵母胞外胞外表达有酶活不蛋白，正常吗？因为没有优化条件是不是分泌量太低啊。
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1楼 2010-12-21 19:33:53
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
有活性就是好事，表达量可以优化的。
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2楼2010-12-21 20:04:08
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jia1012428

铜虫 (小有名气)
恩 多谢
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3楼2010-12-22 00:17:21
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tongxinkxy

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
请问您可以赠送一些毕赤酵母菌株和载体菌株吗？
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4楼2010-12-22 07:59:22
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
测活方法特异吗
有些酶在酵母中还是有背景表达的
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5楼2010-12-22 09:07:00
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dhmdddd

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by zhaocy8903 at 2010-12-22 09:07:00:
测活方法特异吗
有些酶在酵母中还是有背景表达的

背景表达式什么意思啊？无遇到了和楼主同样的问题，蛋白胶跑不出来但是有酶活……
赞一下(1人) 回复此楼
上班族，学习ing……
6楼2010-12-22 09:34:02
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mlw8486

银虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
silicare(金币+1):谢谢参与 2010-12-22 12:03:52
很正常啊  因为表达量比较低比酶活又较高   可以试一下浓缩
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justsoso......
7楼2010-12-22 09:52:36
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jia1012428

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zhaocy8903 at 2010-12-22 09:07:00:
测活方法特异吗
有些酶在酵母中还是有背景表达的

比较特异，做了发酵液不加底物的对照，还做了另外对照就是空质粒加底物和不加底物，结果都是阴性，可以说我表达出来了吗？
这个菌是从2mg/ml的G418平板上筛选出来的，目前还没有提基因组，是不是应该没啥问题啊。
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8楼2010-12-22 18:58:05
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jjwhl

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主，你的酶蛋白在毕赤酵母中的表达量，是不是很低啊？如果跑SDS-PAGE电泳可以看到条带，而测酶活很低的话，是不是说表达量低？你的表达量问题，最终怎么解决的？
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9楼2015-03-16 20:06:53
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