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hrjxx

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白电泳,第二向,溴酚蓝不是一条线,有两个向上的凸起,是什么原因造成的啊

在双向电泳,跑垂直电泳时,溴酚蓝,没有成一直线,而是有两个向上的凸起,请问大家这是什么原因造成的 啊??对蛋白有影响嘛??
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Rubisco580

金虫 (小有名气)

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西瓜: 金币+2, 鼓励应助! 2012-03-22 12:21:47
hrjxx: 金币+1, 有帮助, 谢谢啊,凸起在中间,不过随着时间的推移,而趋平整,如果是凝的不好的话,是不是应该越来越明显的呢 2012-03-22 14:19:27
不知道你的突起在什么地方。如果是两边的话没问题,那是因为垂直电泳仪两边的电场是不均匀的,中间的齐就行了。
如果突起在中间的话,有可能是胶的问题,灌胶的时候有漏胶或者胶凝的不好导致网格不均匀。而且染色后会发现蛋白同样跑歪了。
2楼2012-03-22 10:49:35
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chenfg

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+3, 鼓励新虫交流! 2012-03-22 12:22:37
hrjxx: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢啊,气泡应该不会,胶面不平倒是有可能啊,不过胶下面电泳液有气泡,不知道会不会有影响啊 2012-03-22 14:21:41
那是你在第一项胶条放到第二项胶上时,没有把封闭液倒平;还有可能是你的第二项胶的上平面不平,或者胶的中间部位有气泡或倒的不均匀。但是如果在胶的两侧应该影响不大。
3楼2012-03-22 11:13:19
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ganfucell

铜虫 (小有名气)

支持金虫的说法!
理想爱情事业
4楼2012-03-22 14:02:06
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chenfg

铜虫 (小有名气)

电泳液有气泡不会有太大影响的,一般垂直板电泳槽都会有循环系统把气泡赶跑一些。
5楼2012-03-22 14:31:03
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清泉

木虫 (著名写手)

根据我的经验,如果是胶的两边,中间平整,那么不会有太大问题,但是如果是中间,那么估计你跑的胶也会有很大偏差,主要原因可能有几方面,一个是第二向制胶的时候出问题了,还有就是从一向转二向的时候胶条不平整。
宝剑锋从磨砺出,梅花香自苦寒来!
6楼2012-03-22 19:18:24
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