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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 咪唑洗下来的蛋白，如何更换成另一种缓冲液，请大侠帮忙
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jiuzy

新虫 (初入文坛)

[求助] 咪唑洗下来的蛋白，如何更换成另一种缓冲液，请大侠帮忙 已有1人参与

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1楼 2012-03-13 15:08:46
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回帖置顶 ( 共有1个 )

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+1, MolEPI+1): Good！ 2012-03-14 22:30:13
透析、凝胶过滤、超滤等手段都可行。看你用哪个方便点。
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5楼2012-03-13 18:14:01
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普通回帖

xuanxuanniu

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
透析，脱盐都可以啊
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2楼2012-03-13 15:32:37
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happywyh

铁虫 (小有名气)
看过一篇文献，不知可不可行~
流出液通过超滤离心管，之后更换缓冲液就可以了~
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3楼2012-03-13 15:45:52
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
凝胶过滤的主要作用不就是用来缓冲液交换的吗，呵呵。
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4楼2012-03-13 18:11:27
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cnliu51

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+2): 鼓励 2012-03-14 11:27:49
我用的就是超滤离心管，里面有能切割一定分子量的膜，经过低温离心，可将大部分原来缓冲液滤掉，将蛋白截留，再加上新的缓冲溶液，如此2-3次即可。
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6楼2012-03-14 11:04:48
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whb21

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
将洗脱下来的目标蛋白溶液装到透析袋里，用PBS透析就可以了。
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7楼2012-03-14 12:07:36
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Charles-glh

金虫 (正式写手)
西瓜: 这种话适合烂在肚子里…… 2012-03-14 22:30:47
内容已删除
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8楼2012-03-14 19:41:22
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withyoo

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

咪唑是小分子，可以通过超滤的方式去除。将咪唑洗脱下来的蛋白质加入超滤管（根据目的蛋白的大小选用合适的超滤管），超滤管会截留你的目的蛋白，咪唑会通过滤膜进入到滤出液，而目的蛋白会被截留在滤膜内，通过更换缓冲液，将滤膜上的目的蛋白洗脱下来即可。
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9楼2017-03-09 22:17:56
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