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jiuzy

新虫 (初入文坛)

[求助] 咪唑洗下来的蛋白,如何更换成另一种缓冲液,请大侠帮忙 已有1人参与

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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+1, MolEPI+1): Good! 2012-03-14 22:30:13
透析、凝胶过滤、超滤等手段都可行。看你用哪个方便点。
5楼2012-03-13 18:14:01
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普通回帖

xuanxuanniu

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
透析,脱盐都可以啊
2楼2012-03-13 15:32:37
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happywyh

铁虫 (小有名气)

看过一篇文献,不知可不可行~
流出液通过超滤离心管,之后更换缓冲液就可以了~
3楼2012-03-13 15:45:52
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
凝胶过滤的主要作用不就是用来缓冲液交换的吗,呵呵。
4楼2012-03-13 18:11:27
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cnliu51

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木(金币+2): 鼓励 2012-03-14 11:27:49
我用的就是超滤离心管,里面有能切割一定分子量的膜,经过低温离心,可将大部分原来缓冲液滤掉,将蛋白截留,再加上新的缓冲溶液,如此2-3次即可。
6楼2012-03-14 11:04:48
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whb21

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
将洗脱下来的目标蛋白溶液装到透析袋里,用PBS透析就可以了。
7楼2012-03-14 12:07:36
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Charles-glh

金虫 (正式写手)


西瓜: 这种话适合烂在肚子里…… 2012-03-14 22:30:47
内容已删除
8楼2012-03-14 19:41:22
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withyoo

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

咪唑是小分子,可以通过超滤的方式去除。将咪唑洗脱下来的蛋白质加入超滤管(根据目的蛋白的大小选用合适的超滤管),超滤管会截留你的目的蛋白,咪唑会通过滤膜进入到滤出液,而目的蛋白会被截留在滤膜内,通过更换缓冲液,将滤膜上的目的蛋白洗脱下来即可。
9楼2017-03-09 22:17:56
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