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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】毕赤酵母表达胞外蛋白，sds电泳后看不到条带
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jia1012428

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】毕赤酵母表达胞外蛋白，sds电泳后看不到条带 已有6人参与

毕赤酵母表达胞外蛋白，能稳定测到酶活，但是正常跑电泳后看不到条带，我想用tca沉淀法，1ml发酵上清，加tca，再用丙酮洗两次，后出现沉淀加1x的loading buffer 20微升，就算不溶也没事，99℃煮10min后就溶了，然后离心取上清跑电泳，不知道可以不，哪位做过给点经验，多谢！
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1楼 2011-01-01 23:45:21
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看不到的原因是分泌表达蛋白量浓度很低，需要浓缩后SDS-PAGE，你说的方法可行。
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2楼2011-01-02 10:03:29
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jia1012428

铜虫 (小有名气)
恩 多谢！！！！
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3楼2011-01-02 18:01:32
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jia1012428

铜虫 (小有名气)
现在浓缩过了 但是感觉空质粒的对照总是跟诱导的不对称 是不是应该拿个不诱导的当对照啊
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4楼2011-01-12 20:11:57
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danbomingyue

禁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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5楼2012-05-03 17:06:20
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gerileyy

禁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
6楼2013-11-18 17:23:21
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charles08

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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4楼: Originally posted by jia1012428 at 2011-01-12 20:11:57
现在浓缩过了 但是感觉空质粒的对照总是跟诱导的不对称 是不是应该拿个不诱导的当对照啊

浓缩后能出来吗？我的是之前什么都没有，但是蛋白测得的浓度很高的。好像没必要浓缩啊
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7楼2017-12-07 07:30:59
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zhxian

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by charles08 at 2017-12-07 07:30:59
浓缩后能出来吗？我的是之前什么都没有，但是蛋白测得的浓度很高的。好像没必要浓缩啊...

请问楼主做出来了吗？
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8楼2018-09-19 22:14:09
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