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jia1012428

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】毕赤酵母表达胞外蛋白,sds电泳后看不到条带 已有6人参与

毕赤酵母表达胞外蛋白,能稳定测到酶活,但是正常跑电泳后看不到条带,我想用tca沉淀法,1ml发酵上清,加tca,再用丙酮洗两次,后出现沉淀加1x的loading buffer 20微升,就算不溶也没事,99℃煮10min后就溶了,然后离心取上清跑电泳,不知道可以不,哪位做过给点经验,多谢!
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
看不到的原因是分泌表达蛋白量浓度很低,需要浓缩后SDS-PAGE,你说的方法可行。
2楼2011-01-02 10:03:29
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jia1012428

铜虫 (小有名气)

恩 多谢!!!!
3楼2011-01-02 18:01:32
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jia1012428

铜虫 (小有名气)

现在浓缩过了 但是感觉空质粒的对照总是跟诱导的不对称 是不是应该拿个不诱导的当对照啊
4楼2011-01-12 20:11:57
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danbomingyue

禁虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

5楼2012-05-03 17:06:20
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gerileyy

禁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

6楼2013-11-18 17:23:21
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charles08

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by jia1012428 at 2011-01-12 20:11:57
现在浓缩过了 但是感觉空质粒的对照总是跟诱导的不对称 是不是应该拿个不诱导的当对照啊

浓缩后能出来吗?我的是之前什么都没有,但是蛋白测得的浓度很高的。好像没必要浓缩啊
7楼2017-12-07 07:30:59
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zhxian

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by charles08 at 2017-12-07 07:30:59
浓缩后能出来吗?我的是之前什么都没有,但是蛋白测得的浓度很高的。好像没必要浓缩啊...

请问楼主做出来了吗?
8楼2018-09-19 22:14:09
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