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Anson1358

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 请教关于酵母诱导蛋白表达的问题alpha-factor是什么东西?

请教一下关于酵母诱导蛋白表达的问题。有这样一段话2 L of cells were grown in YP-raffinose at 30℃ to a cell density of 4×107 cells per ml and arrested for 3 h with 100 ng/ml of alpha-factor. Protein expression was induced by adding galactose (2%) and incubating at 30 ℃ for 3–4 h.其中arrested for 3 h with 100 ng/ml of alpha-factor是什么意思?alpha-factor是什么东西。没做过这个,不懂呀!望高手指点。谢谢
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Anson1358: 金币+2, 有帮助, 谢谢,alpha-factor怎么检测?你做酵母表达方面的吗? 2013-05-16 14:20:56
Anson1358(myprayer代发): 金币+1, 感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-17 14:46:56
alpha-factor是酵母里常用的分泌信号肽,由10个左右的特定氨基酸组成;应该理解为:诱导表达3小时时,检测到发酵液中alpha-factor的浓度为100 ng/ml。
以上为我个人的理解,你再看看其它人的回复吧。
2楼2013-05-16 12:56:01
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ganchao1776 at 2013-05-16 12:56:01
alpha-factor是酵母里常用的分泌信号肽,由10个左右的特定氨基酸组成;应该理解为:诱导表达3小时时,检测到发酵液中alpha-factor的浓度为100 ng/ml。
以上为我个人的理解,你再看看其它人的回复吧。

检测方法有很多, 你再仔细的看看文献,看看有没有介绍用的什么方法
3楼2013-05-17 01:12:43
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不转录的DNA

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Anson1358(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-17 14:47:06
Anson1358: 金币+6, ★★★很有帮助, 谢谢!请问你做过酵母诱导蛋白表达方面的实验吗? 2013-05-17 18:01:53
楼主,看你这个帖子已经好几天没人回复!我来说说自己的见解吧!

他的大体意思是2L的酵母细胞在YP-raffinose中30度培养至4×107 cells per ml 时,用100ng/ml的alpha-factor抑制细胞的增长3h,然后通过添加2%的葡萄糖在30度条件下诱导蛋白表达3~4h!

因为alpha-factor他是具有抑制细胞有丝分裂G1的作用,抑制有丝分裂,从而阻止细胞的增殖!细胞不增殖,他就开始增长,合成初级代谢物和次级代谢物了!通过添加葡萄糖来诱导他表达蛋白质!
不知我翻译的对不对?希望能给你建议!
长得比我英俊的,没我有才华!有才华的,没我长得俊!
4楼2013-05-17 13:22:00
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不转录的DNA

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 不转录的DNA at 2013-05-17 13:22:00
楼主,看你这个帖子已经好几天没人回复!我来说说自己的见解吧!

他的大体意思是2L的酵母细胞在YP-raffinose中30度培养至4×107 cells per ml 时,用100ng/ml的alpha-factor抑制细胞的增长3h,然后通过添加2%的葡 ...

没有做过!只是懂得一些理论知识,还有就是自己的英文阅读能力比较好

如果你想继续问!我可以再给你解答!我师兄师姐他们做过,我可以帮你问问!!!
长得比我英俊的,没我有才华!有才华的,没我长得俊!
5楼2013-05-17 18:19:30
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不转录的DNA

金虫 (小有名气)

没有做过!只是懂得一些理论知识,还有就是自己的英文阅读能力比较好

如果你想继续问!我可以再给你解答!我师兄师姐他们做过,我可以帮你问问!!!
长得比我英俊的,没我有才华!有才华的,没我长得俊!
6楼2013-05-17 18:20:15
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Anson1358

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 不转录的DNA at 2013-05-17 18:20:15
没有做过!只是懂得一些理论知识,还有就是自己的英文阅读能力比较好

如果你想继续问!我可以再给你解答!我师兄师姐他们做过,我可以帮你问问!!!

如果你能帮我问一下就更好了!呵呵,能不能帮我问一下具体步骤,要是有protocol就好了!
一个人可以不成功,但不可以不成长!
7楼2013-05-18 16:27:01
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flyxiao

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 不转录的DNA at 2013-05-17 13:22:00
楼主,看你这个帖子已经好几天没人回复!我来说说自己的见解吧!

他的大体意思是2L的酵母细胞在YP-raffinose中30度培养至4×107 cells per ml 时,用100ng/ml的alpha-factor抑制细胞的增长3h,然后通过添加2%的葡 ...

正解
8楼2015-12-22 13:34:25
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