| 查看: 2060 | 回复: 4 | ||
[求助]
我想做两个基因的融合克隆表达，怎么设计引物使两个基因融合啊？ 已有2人参与
|
我想做两个基因的融合克隆表达，怎么设计引物使两个基因融合啊？是不是需要两个引物设计一个相同的酶切位点，先把两基因扩增出来，再双酶切，用T4连接，就能成功融合了？？？谢谢各位大神了 |
回复此楼» 猜你喜欢
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有114人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 急！！！这种基因克隆需不需要用RACE
已经有7人回复
- 急急急，如何设计一个已知基因的引物，克隆基因使原核表达，怒送金币
已经有11人回复
- 请问设计引物前为什么要进行同源性比较？？
已经有15人回复
- DKK4基因的克隆，我现在
已经有7人回复
- 引物设计——下游引物是否需要考虑阅读框问题
已经有6人回复
- 克隆表达 引物设计
已经有31人回复
- 请问克隆表达时目的片段前多加了KOZAK序列会影响融合蛋白表达吗？
已经有5人回复
- 从头设计引物克隆全长基因
已经有22人回复
- 做共表达，用什么克隆方法比较好呢？
已经有14人回复
- 克隆基因点突变如何解决
已经有4人回复
- 如何设计引物扩增片段？做克隆的
已经有11人回复
- 我有几个克隆和基因重组的基本问题不太清楚，请各位帮帮忙！
已经有6人回复
- 基因克隆表达中信号肽的问题
已经有11人回复
- 想要设计引物 可是NCBI中blast后只有蛋白序列 如何得到基因序列 谢谢啊
已经有15人回复
- 求助-基因克隆及引物设计的问题
已经有6人回复
- 引物设计的问题
已经有13人回复
- 要P一段基因全长，已知CDS，怎么设计引物啊？
已经有10人回复
- 请教各位高人，基因克隆表达的流程是什么？
已经有8人回复
- 单个基因的克隆和表达可以发在什么杂志上
已经有4人回复
- 做蛋白体外表达时的引物设计问题！
已经有12人回复
- 【求助/交流】求助：做基因克隆表达的时候，怎么选基因？
已经有7人回复
- 【求助/交流】基因做表达实验必须要克隆全长吗？
已经有7人回复
- 【求助/交流】基因克隆设计引物
已经有7人回复
- 【求助/交流】真菌的基因克隆与表达
已经有7人回复
- 克隆基因全长引物设计问题
已经有32人回复
lvbobo823
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 363 (硕士)
- 金币: 7753.3
- 散金: 15
- 红花: 9
- 帖子: 751
- 在线: 189.4小时
- 虫号: 819723
- 注册: 2009-07-31
- 性别: GG
- 专业: 植物遗传学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sckcf: 金币+4, ★★★★★最佳答案, 谢谢了 2014-01-14 17:21:25
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-01-15 08:30:20
感谢参与，应助指数 +1
sckcf: 金币+4, ★★★★★最佳答案, 谢谢了 2014-01-14 17:21:25
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-01-15 08:30:20
| 融合表达首先你确定哪个基因在前克隆这个基因片段时就要去掉终止子，必须保证后基因读码框与前基因一致。两个基因融合一块可以有两种方式一是你所说的添加酶切位点，但是麻烦些，你需要先克隆一个片段到某个中间载体上，酶切再连另一载体，当然双片段连接也可以但成功率较低。另一方法是做个overlap PCR直接克隆这两个片段（引物上有共有序列）在一块。一定要验证你的编码框不能移位。 |
2楼2014-01-14 17:06:43
力亮
木虫 (小有名气)
- 应助: 17 (小学生)
- 金币: 3114.5
- 散金: 66
- 帖子: 219
- 在线: 217.3小时
- 虫号: 1100577
- 注册: 2010-09-16
- 性别: GG
- 专业: 兽医免疫学
3楼2014-01-14 18:11:40
4楼2014-01-14 19:23:22
力亮
木虫 (小有名气)
- 应助: 17 (小学生)
- 金币: 3114.5
- 散金: 66
- 帖子: 219
- 在线: 217.3小时
- 虫号: 1100577
- 注册: 2010-09-16
- 性别: GG
- 专业: 兽医免疫学
5楼2014-01-16 12:26:06
10