应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 急急急，如何设计一个已知基因的引物，克隆基因使原核表达，怒送金币
121/2返回列表12下一页
查看: 2552  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

tankleiming

新虫 (小有名气)

[求助] 急急急，如何设计一个已知基因的引物，克隆基因使原核表达，怒送金币

现在是刚刚搞到分子这边，许多东西不是很懂，问题如下


我们老师让设计一种细菌外膜蛋白的的基因的引物，用来与那和表达，我不知道怎么做
1.  已经找到这个基因的完整的cds，大概1000bp
2.怎么找到两边的序列来设计引物，用pcr吧这个基因扩增出来？
3. 是不是在引物里面加酶切位点？有什么要求吗
                                                                     


基本就是这些，谢谢大家了，很急啊
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
之所以深沉
1楼 2013-12-01 13:33:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-01 14:50:55
如何通过已知序列设计引物获得该基因的全序列？
http://muchong.com/html/201209/4846230.html
【求助】已知一段基因序列，如何设计引物测序
http://www.dxy.cn/bbs/topic/14851632
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2013-12-01 14:01:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖

★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-01 14:51:03
要P一段基因全长，已知CDS，怎么设计引物啊？
http://muchong.com/html/201201/4055754.html
赞一下 回复此楼
3楼2013-12-01 14:02:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

deguohan

至尊木虫 (职业作家)

教授、博/硕导

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-01 19:20:07
tankleiming: 金币+50, ★★★很有帮助 2013-12-05 09:45:31
要P一段基因全长，已知CDS，怎么设计引物啊？http://muchong.com/html/201201/4055754.html  
还可以直接在两头抄写一段序列，5‘直接抄，3’反向互补，2个序列退货温度差不多即可！！！！！多设计几对
赞一下 回复此楼
天道酬勤，厚德载物
4楼2013-12-01 15:05:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

貓貓

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你可以邮件锐博，他会免费帮你设计，然后你再核对一下。
如果自己设计的话，首先要在已知序列上找18-25bp，这是你的引物长度，目的条带在100-200bp之间，引物的3‘端不要出现连续的A（大于等于3），GC比要在45%-55%之间
赞一下 回复此楼
5楼2013-12-02 09:07:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jennifermatt

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-03-28 17:08:52
直接从头到尾的对齐设计，加保护碱基，酶切位点，起始密码子，对应的引物序列即可。选酶切位点时，注意可以共酶切就行。
赞一下 回复此楼
求是
6楼2013-12-03 11:04:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海洋圈圈

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-03-28 17:09:02
做原核表达的话最好软件分析下蛋白质疏水性
赞一下 回复此楼
7楼2013-12-03 14:02:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

grape_vine

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我觉得你应该找周围会做得人,问一下基本中就弄明白了!
赞一下 回复此楼
8楼2013-12-03 21:26:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三蛰

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
最基本的，可以在各种论坛的各种板块找到，自己找一找
赞一下 回复此楼
我不会！
9楼2013-12-04 08:45:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zilinweizhu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
primer 5引物设计软件设计引物就行了，引物两端一般要加上酶切位点，方便后续的操作
赞一下 回复此楼
10楼2013-12-04 12:39:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tankleiming 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 283求调剂 +8 小楼。 2026-03-12 11/550 2026-03-16 09:46 by 无际的草原
[考研] 0703化学调剂 290分有科研经历，论文在投 +6 腻腻gk 2026-03-14 6/300 2026-03-16 09:39 by 闲人终南山
[考研] 材料专硕326求调剂 +4 墨煜姒莘 2026-03-15 4/200 2026-03-15 11:02 by dyw
[考研] 材料工程327求调剂 +3 xiaohe12w 2026-03-11 3/150 2026-03-14 20:20 by ms629
[考研] 328求调剂 +3 5201314Lsy！ 2026-03-13 6/300 2026-03-14 15:31 by hyswxzs
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +7 邱gl 2026-03-10 11/550 2026-03-14 12:18 by 邱gl
[考研] 288求调剂 +14 王晓阳- 2026-03-09 19/950 2026-03-14 02:05 by JourneyLucky
[考研] 0856材料与化工309分求调剂 +6 ZyZy…… 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:38 by JourneyLucky
[考研] 26考研调剂 +3 ying123. 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:18 by JourneyLucky
[考研] 311求调剂 +8 zchqwer 2026-03-10 8/400 2026-03-14 00:01 by JourneyLucky
[考研] 281求调剂 +9 Koxui 2026-03-12 11/550 2026-03-13 20:50 by Koxui
[考研] 求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-12 5/250 2026-03-13 18:31 by ms629
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-12 5/250 2026-03-13 15:56 by 棒棒球手
[考研] 304求调剂（085602一志愿985） +12 化工人999 2026-03-09 12/600 2026-03-13 12:02 by JourneyLucky
[考研] 工科0856专硕化学工程269能调剂吗 +10 我想读研11 2026-03-10 10/500 2026-03-13 10:14 by Yuyi.
[考研] 一志愿河海大学085900土木水利专硕279求调剂不挑专业 +4 SunWwWwWw 2026-03-10 8/400 2026-03-13 02:23 by SunWwWwWw
[考研] 一志愿江南大学085701环境工程专硕总分287求调剂 +5 18266118446 2026-03-09 5/250 2026-03-11 16:51 by 2020015
[基金申请] 提交后的基金本子，已让学校撤回了，可否换口子提交 +3 dut_pfx 2026-03-10 3/150 2026-03-11 08:38 by kudofaye
[考研] 调剂 +5 呵唔哦豁 2026-03-10 5/250 2026-03-10 22:00 by 28375m
[考博] 26申博求助 +3 跳跃饼干 2026-03-10 4/200 2026-03-10 21:15 by Tntcnn
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭