| 查看: 3038 | 回复: 13 | ||
崔永霞铁虫 (小有名气)
|
[求助]
引物设计 基因全长的获得
|
|
| 各位高手想向大家请教一下，我想扩一个基因的全长，包括这个基因的内含子，我现在有这个基因的编码cDNA序列，我该如何设计引物才能扩出这个基因的包含内含子的全长呢？我是不是可以在编码框外设计引物呢？我前一段时间跨起始密码子和终止密码子设计了一对引物，特异性不是很好！郁闷的！ |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有210人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有8人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 人类基因组DNA引物设计问题
已经有7人回复
- 关于基因测序引物的设计
已经有7人回复
- 从头设计引物克隆全长基因
已经有22人回复
- 如何用一直的一小段EST得到基因全长，求高手指教~
已经有7人回复
- 如何通过已知序列设计引物获得该基因的全序列？
已经有12人回复
- 想要设计引物 可是NCBI中blast后只有蛋白序列 如何得到基因序列 谢谢啊
已经有15人回复
- 拿到基因全长，做什么？
已经有10人回复
- 通过RT-PCR 获得了一段保守序列 接着如何设计RACE引物
已经有21人回复
- 求助-基因克隆及引物设计的问题
已经有6人回复
- 要P一段基因全长，已知CDS，怎么设计引物啊？
已经有10人回复
- 载体构建技术请教，如何设计引物提取基因插入载体中？
已经有3人回复
- 已经带his标签目的蛋白基因如何设计引物啊（目的基因已经接在pET-22b的载体上了）
已经有8人回复
- 如何设计引物，扩增目的基因的ORF？
已经有6人回复
- 【求助/交流】多拷贝基因的引物设计为什么特别重要？
已经有3人回复
- 【求助/交流】基因克隆设计引物
已经有7人回复
- 【求助】求教基因克隆中的引物设计问题【有效期至2010年11月18日】
已经有6人回复
- 【求助/交流】求助：关于做过量表达的基因的引物设计！
已经有4人回复
- 克隆基因全长引物设计问题
已经有32人回复
|
1 所谓的基因的DNA序列,其实是很难确定的.因为你不知道这个基因编码区前面的调控区有多长. 2 一般说得到一个基因的DNA序列，是指包含了编码区和内含子的区域。 3 从你说的来看，你这个物种应该是没有基因组吧。那你就从已有序列的两头设计序列，在基因组上去扩增就是了。 扩不出来就换个位置。只要引物不是刚好就跨在内含子和外显子之间，扩增出来问题不打。 4 你所说的特异性不好不知道是什么情况？ 一般来说大家都喜欢扩增出来时单一条带。但是其实有背景也没关系。只要有主带，就可以继续往下做，无非是后面验证小心一点，测序多送两个。 5 另外，你知道大概扩增出来的序列有多长吗？ 如果你很不确定，那还是换引物慢慢试的好。 6 以上其实是一种最快的办法。如果一直失败，那可能还要walking。 但是在做walking之前，还是要选一段能在基因组上扩增出来的序列，好用来在上面设计引物。不然还是不能避免引物的问题。染色体步移对引物的要求更高。怎么做walking， 可以参看不同公司的试剂盒说明书，比教科书还清楚。 希望对你有所帮帮助！ |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
崔永霞10楼2013-08-09 16:18:31
6楼2013-08-09 00:59:54
duoyidian
木虫 (正式写手)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 2609.1
- 红花: 1
- 帖子: 317
- 在线: 238.3小时
- 虫号: 2347348
- 注册: 2013-03-14
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
2楼2013-08-08 18:52:09
崔永霞
铁虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 2349.7
- 散金: 82
- 红花: 4
- 帖子: 275
- 在线: 71.9小时
- 虫号: 1967965
- 注册: 2012-09-01
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
3楼2013-08-08 19:20:52
duoyidian
木虫 (正式写手)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 2609.1
- 红花: 1
- 帖子: 317
- 在线: 238.3小时
- 虫号: 2347348
- 注册: 2013-03-14
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
4楼2013-08-08 21:59:39
duoyidian
木虫 (正式写手)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 2609.1
- 红花: 1
- 帖子: 317
- 在线: 238.3小时
- 虫号: 2347348
- 注册: 2013-03-14
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
5楼2013-08-08 22:01:55
崔永霞
铁虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 2349.7
- 散金: 82
- 红花: 4
- 帖子: 275
- 在线: 71.9小时
- 虫号: 1967965
- 注册: 2012-09-01
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
7楼2013-08-09 10:41:32
崔永霞
铁虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 2349.7
- 散金: 82
- 红花: 4
- 帖子: 275
- 在线: 71.9小时
- 虫号: 1967965
- 注册: 2012-09-01
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
8楼2013-08-09 10:43:46
duoyidian
木虫 (正式写手)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 2609.1
- 红花: 1
- 帖子: 317
- 在线: 238.3小时
- 虫号: 2347348
- 注册: 2013-03-14
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
9楼2013-08-09 11:50:57
