| 查看: 2871 | 回复: 6 | ||
lyl2ds铜虫 (初入文坛)
|
[求助]
求助-基因克隆及引物设计的问题
|
| 我现在想克隆出一段基因，需要设计简并引物，我又7条序列通过clustal比对找出了保守区，想将这保守区的全长克隆出来，想请教下高人，帮我设计下简并引物！我是新手，请各位高人指教！ |
回复此楼» 本帖附件资源列表
-
欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com - 附件 1 : cDNA比对结果.txt
2012-03-06 16:42:41, 15.85 K
» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有202人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有7人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
lyl2ds
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 477.5
- 散金: 5
- 帖子: 38
- 在线: 14.7小时
- 虫号: 1469265
- 注册: 2011-10-31
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
2楼2012-03-06 16:47:27
海阔天空8158
木虫 (著名写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 25 (小学生)
- 金币: 5472.1
- 红花: 4
- 帖子: 1127
- 在线: 448.3小时
- 虫号: 770028
- 注册: 2009-05-14
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
lyl2ds
3楼2012-03-08 17:28:07
4楼2012-03-08 20:26:42
lyl2ds
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 477.5
- 散金: 5
- 帖子: 38
- 在线: 14.7小时
- 虫号: 1469265
- 注册: 2011-10-31
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
5楼2012-03-11 19:16:52
lyl2ds
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 477.5
- 散金: 5
- 帖子: 38
- 在线: 14.7小时
- 虫号: 1469265
- 注册: 2011-10-31
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
6楼2012-03-11 19:17:33
守望者047
金虫 (小有名气)
- 应助: 16 (小学生)
- 金币: 819.2
- 散金: 15
- 帖子: 227
- 在线: 61.2小时
- 虫号: 1232991
- 注册: 2011-03-14
- 性别: GG
- 专业: 消化系统肿瘤
【答案】应助回帖
★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助，欢迎常来 2012-06-08 13:52:00
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助，欢迎常来 2012-06-08 13:52:00
我们碰到的问题是一样的，所用的方法也是一样的，我要克隆的是某物种MHC的基因，您的第一步也是提取总的RNA和DNA吧，呵呵，我也在设计引物，准备以总RNA中相应的mRNA为模板RTPCR得到cDNA的第一条链，通过对7条其他物种MHC的mRNA的序列比对（用clustalx）找到了相对保守的序列，打算在5·端设计一个特异性引物，3·端先设计特异引物，不行就用Oligo（dT）；另一方面，根据文献中给出的cDNA序列找到同源性较高的区段，重新设计引物，以总DNA为模板PCR，对扩增出来的片段和DNA模板进行测序。两者比较可以找到相应的外显子和内含子序列。我也是分子新手，不敢确定这样做到底对不对，但还是希望能帮到您。 |
7楼2012-06-08 10:41:11
