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lyl2ds

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求助-基因克隆及引物设计的问题

我现在想克隆出一段基因,需要设计简并引物,我又7条序列通过clustal比对找出了保守区,想将这保守区的全长克隆出来,想请教下高人,帮我设计下简并引物!我是新手,请各位高人指教!
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  • 附件 1 : cDNA比对结果.txt
  • 2012-03-06 16:42:41, 15.85 K

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boshiyucun

新虫 (初入文坛)

简并引物并没有那么难,只是注意一下简并度不要太高,其他就按照一般引物的条件去设计就可以了,PCR时候可以设置一个温度TD基本都没有问题的!祝试验顺利!

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2012-03-08 20:26:42
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查看全部 7 个回答

lyl2ds

铜虫 (初入文坛)

还有问题,就是我认为的保守区是1-884,不知道是不是正确的,如果是正确的我想把1-884这段基因全长克隆出来,需要能克隆出全长的引物,我之前设计了一个,但是没P出来,想再重新设计个,请高人指教!
2楼2012-03-06 16:47:27
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海阔天空8158

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木(金币+5): 呵呵,多谢支持 2012-03-09 09:38:31
兼并引物的设计有时候是很难得到引物的。
需要花费很长时间切胶,克隆,测序。
祝实验顺利。

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天行健,君子以自强不息;地势坤,君子以厚德载物。
3楼2012-03-08 17:28:07
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lyl2ds

铜虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
: Originally posted by boshiyucun at 2012-03-08 20:26:42:
简并引物并没有那么难,只是注意一下简并度不要太高,其他就按照一般引物的条件去设计就可以了,PCR时候可以设置一个温度TD基本都没有问题的!祝试验顺利!

谢谢您!我又用P5设计了个引物,可是效果还是不好!您能帮我分析下原因吗
5楼2012-03-11 19:16:52
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