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崔永霞

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10楼: Originally posted by grape_vine at 2013-08-09 16:18:31
1 所谓的基因的DNA序列,其实是很难确定的.因为你不知道这个基因编码区前面的调控区有多长.
2 一般说得到一个基因的DNA序列，是指包含了编码区和内含子的区域。
3 从你说的来看，你这个物种应该是没有基因组吧。那 ...

非常感谢！我先前跨起始密码子和终止密码子设计了一对引物，预计扩增长度是1200bp，刚开始的时候能够扩出来，感觉特异性也还好，可是隔了一周就再也扩不出来了，也不知道什么原因，各种方法都试过了，还是没办法。我传两张图片麻烦grape_vine帮我分析分析是怎么回事，拜托啦！

引物设计基因全长的获得

S2yi一周前做的.jpg

引物设计基因全长的获得-1

S2一周后做的.jpg

引物设计基因全长的获得-2

S2 重复一周后做的.jpg

每个人都有心底最柔软的地方，请不要触碰它，因为每个人都有自己的尊严！

11楼2013-08-09 16:48:33

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崔永霞

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9楼: Originally posted by duoyidian at 2013-08-09 11:50:57
具体是什么植物啊，NCBI上能够blast出来的，我师兄就是这么做的他还说接着做了一个WALKING...

现在这个植物的基因组还没有测序出来，你说的那个取高度保守的序列设计引物扩出来一个片段，然后基于这个片段再做WALKING，最后得到全长。我是想看看可不可以直接扩出来。

每个人都有心底最柔软的地方，请不要触碰它，因为每个人都有自己的尊严！

12楼2013-08-09 16:58:31

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yangsusu123

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楼主，我也是跟你一样的做法，你做出来了吗？我最近在扩，但是一直结果不是很理想！

13楼2013-11-26 10:45:38

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11菜鸟11

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亲，你的这个做出来了么？我最近也在做这个，也是这个问题，你做出来的话可以教教我么？

14楼2016-01-25 21:00:46

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