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zishilanxuan

金虫 (小有名气)

[求助] 请教各位高人,基因克隆表达的流程是什么?

由于我是一个新手,对这个基因克隆表达,以及定点突变等方面的步骤和只是还很欠缺,所以我想尽快补上,但就是不知道从何入手,还请各位牛人多多帮助!!
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小丹木木

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖


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西瓜(金币+1): 去图书馆借也ok哈~ 2012-01-06 18:53:13
去买一本分子生物学实验指导,就好了,上面很详细的
2楼2012-01-06 16:50:14
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zishilanxuan

金虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by 小丹木木 at 2012-01-06 16:50:14:
去买一本分子生物学实验指导,就好了,上面很详细的

哦,谢谢啊~~
3楼2012-01-07 08:22:53
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖


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西瓜(金币+1, 专家考核): 常来呀 2012-01-10 17:31:51
必备:分子克隆 分子生物学 基因8
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
4楼2012-01-07 15:17:08
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lixingliang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
既然是新手,就应该首先自己学习一下基本知识,分子克隆,分子生物学之类的书最起码看上一遍,然后开始试验,在实践中应用学到的理论知识,如果有了什么问题,在和各个虫子们交流
我不管你看起看不起我,我都是个演员
5楼2012-01-08 08:02:57
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海阔天空8158

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


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西瓜(金币+1): 欢迎交流! 2012-01-10 17:32:13
zishilanxuan(金币+1): ★★★★★最佳答案 2012-01-12 17:15:57
不外乎几个字,而已,提纲挈领一下:
分:得到目的片段
切:对目的片段和载体进行切割
接:连接酶连接,使目的片段插入正确的载体位点
转:将重组载体转化到宿主细胞
筛:筛选阳性克隆
表:扩增目的片段,表达目的基因
具体的自己找本书研究一下。
天行健,君子以自强不息;地势坤,君子以厚德载物。
6楼2012-01-10 14:23:43
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rtt0325

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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去找pET原核表达手册吧,是novagen的用户手册一类的东西,上面有全套流程,专门讲表达的
7楼2012-01-10 20:07:24
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whb21

木虫 (著名写手)

现确定你要表达的基因是原核还是真核,具体流程差不多,只是所用的表达载体和宿主不同,之后找找文献或者工具书就可以了  祝好运
8楼2012-02-02 10:32:45
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biobiobio

新虫 (初入文坛)


分子克隆指南你不用看上一遍,经常翻翻就好了,用到哪就去查查看看,相信会给你不少帮助
9楼2012-11-26 20:23:41
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