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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】基因做表达实验必须要克隆全长吗？
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zqt123_1981

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】基因做表达实验必须要克隆全长吗？ 已有7人参与

各位：我想在我的植物材料里克隆一个基因并做表达（转模式植物等），基因已知但此前未见报道从我的植物材料里克隆过，我可以根据别的植物材料的同源序列比对用保守区来设计引物，这样P出来的应该是该基因的部分序列吧？那我想进一步R研究该基因的功能，比如构建转基因表达载体等，还用克隆全长吗？全场出了RACE试剂盒还有没有便宜点的东西啊 ，这东西太贵 我怕做不好浪费了不说，领导不满意不好交代啊。

[ Last edited by zqt123_1981 on 2010-11-19 at 20:26 ]
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1楼 2010-11-19 12:30:36
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微笑漩涡

新虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):鼓励交流 2010-11-19 13:36:48
基因的功能研究一般来说是要全长的。你用保守序列扩增出的片段是部分序列，必须用一些手段获得已知序列的侧翼序列才行。
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2楼2010-11-19 12:34:29
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shuxian1

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
一般扩增一段新基因的全长用RACE方法
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我与你一起闯天下
3楼2010-11-19 15:14:53
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hnndpt

铁虫 (正式写手)
肯定是需要全长的
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4楼2010-11-19 16:18:33
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脱水拂空

铜虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你可以用最经典的RACE方法扩基因，结果应该一样的，你可以试试看。对于做基因功能最好是基因全长。
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5楼2010-11-21 00:49:01
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wangy0908

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
必须是全长基因的。否则你怎么知道它表达的就是该基因的属性。毕竟多基因重叠是普遍现象
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6楼2010-11-21 03:48:36
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huigoo

木虫之王 (文坛精英)

童心看世界！
我去问问我老婆！
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多元而卓越，灌水最安全！
7楼2010-11-21 05:00:51
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cellliu

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你可以单独购买Smart的反转录酶，不需要买试剂盒的
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8楼2012-06-27 20:25:05
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