24小时热门版块排行榜    

查看: 2898  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

tankleiming

新虫 (小有名气)

[求助] 急急急,如何设计一个已知基因的引物,克隆基因使原核表达,怒送金币

现在是刚刚搞到分子这边,许多东西不是很懂,问题如下


我们老师让设计一种细菌外膜蛋白的的基因的引物,用来与那和表达,我不知道怎么做
1.  已经找到这个基因的完整的cds,大概1000bp
2.怎么找到两边的序列来设计引物,用pcr吧这个基因扩增出来?
3. 是不是在引物里面加酶切位点?有什么要求吗
                                                                     


基本就是这些,谢谢大家了,很急啊
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

之所以深沉
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

deguohan

至尊木虫 (职业作家)

教授、博/硕导

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-12-01 19:20:07
tankleiming: 金币+50, ★★★很有帮助 2013-12-05 09:45:31
要P一段基因全长,已知CDS,怎么设计引物啊?http://muchong.com/html/201201/4055754.html  
还可以直接在两头抄写一段序列,5‘直接抄,3’反向互补,2个序列退货温度差不多即可!!!!!多设计几对
天道酬勤,厚德载物
4楼2013-12-01 15:05:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2013-12-01 14:50:55
如何通过已知序列设计引物获得该基因的全序列?
http://muchong.com/html/201209/4846230.html
【求助】已知一段基因序列,如何设计引物测序
http://www.dxy.cn/bbs/topic/14851632
2楼2013-12-01 14:01:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖


myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2013-12-01 14:51:03
要P一段基因全长,已知CDS,怎么设计引物啊?
http://muchong.com/html/201201/4055754.html
3楼2013-12-01 14:02:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

貓貓

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你可以邮件锐博,他会免费帮你设计,然后你再核对一下。
如果自己设计的话,首先要在已知序列上找18-25bp,这是你的引物长度,目的条带在100-200bp之间,引物的3‘端不要出现连续的A(大于等于3),GC比要在45%-55%之间
5楼2013-12-02 09:07:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 科研孤儿太难了 +15 我4大白菜 2026-08-20 16/800 2026-08-21 11:07 by yming1319
[基金申请] 我面上完蛋了 +6 且听虎啸 2026-08-20 6/300 2026-08-21 10:59 by Vivilian
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 让我中一个面上吧! +10 大萍1987 2026-08-20 12/600 2026-08-21 09:31 by 020100099
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +4 archvillain 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:10 by gatelove
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +15 医学老男孩 2026-08-20 17/850 2026-08-20 20:35 by CaoLG
[基金申请] 时间戳又变了 +12 wuchongjun 2026-08-20 17/850 2026-08-20 20:05 by spzhao
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
请填处理意见