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菜菜0929木虫 (小有名气)
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急！！！这种基因克隆需不需要用RACE
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| 转录组测序后筛选出差异基因，克隆这样的基因需要用RACE技术吗？ |
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送红花一朵 |
我刚才看了一下，你能不能帮我判断一下我这样的流程正不正确？ 第一步，把转录组测序得到的其中一个差异基因序列输入OFR finder，的到了一个长的OFR 2.把得到的这个OFR的氨基酸序列放到NCBI Conserved domains检验，发现它属于一个蛋白家族，这说明我得到的OFR是正确的 第三步，利用这个OFR设计引物 第四步，从cDNA里用这个引物扩出全长 我这个流程是正确的吗？还有就是我第一步用来寻找OFR的序列是直接用我测序得到的序列还是用把测序序列比对到NCBI上得到的同源序列？（我之所以有这个疑问是因为老师说考虑到测序得到的序列是contig、unigene拼接出来的，可能不完全准确） 请帮我回答一下，万分感谢  |
6楼2013-12-30 10:33:11
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