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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大片段基因组DNA克隆，有好方法的进来讨论下
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frish2008

铁虫 (初入文坛)

[交流] 大片段基因组DNA克隆，有好方法的进来讨论下 已有2人参与

我现在想从基因组里面克隆一段200kb的片段，应该要放到BAC里面。各位大神有没有什么好办法？我不想2K2K的扩PCR之后再搭接。
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1楼 2013-10-23 17:42:01
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happy361

木虫 (正式写手)
建库，筛库。
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2楼2013-10-24 19:57:05
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frish2008

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by happy361 at 2013-10-24 19:57:05
建库，筛库。

怎么筛呢？我是要一段特定的序列。要怎么建库呢
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3楼2013-10-25 16:42:22
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木含24

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
那应该还没有这技术吧，你想克隆特定的大片段吧？只有建库再设计引物筛选了。1建BAC文库，可以先小点试试（少挑点克隆）  2针对你的片段设计引物      3用引物在克隆里PCR     4扩增到你要的东西的克隆里就很可能有你要的大片段。

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4楼2013-10-25 17:00:09
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