24小时热门版块排行榜    

查看: 1411  |  回复: 6

逆天打酱油

金虫 (正式写手)

[求助] 已有基因组文库,求目的基因全序列的克隆子

已构建野生型大肠杆菌基因组文库,想获得含有全序列glnA 基因的克隆子,试验怎么设计?

初涉此类试验,求指教!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

逆天打酱油

金虫 (正式写手)

木有人咩。。顶一下。。。
2楼2013-03-02 09:09:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jingg1990

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

最近也要接触这个方面的试验,看看有回复的不
3楼2013-03-05 14:15:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

adatoua

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
zhangxingc: 金币+3, 应助指数+1, 鼓励交流 2013-03-05 17:03:42
大肠杆菌基因组不是报道过吗?想获得含有全序列glnA 基因的克隆子,直接pcr这个基因不就行了吗,为啥要建库?
4楼2013-03-05 16:45:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

逆天打酱油

金虫 (正式写手)

就是基于不知道基因碱基的情况下的方法研究,如果直接基因合成就木有意义鸟。。。
个人设想应该是要利用glnA的功能,转入大肠杆菌涂选择平板
目前是不知道怎么设置筛选。。。求指教
5楼2013-03-05 18:20:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

adatoua

铜虫 (正式写手)

你是准备考研的吧?
6楼2013-03-05 18:42:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaojuan1985

新虫 (正式写手)

您好,我想咨询你一下细菌基因文库构建的问题。
我的是一个革兰氏阳性菌,基因组经Sau 3AI不完全酶切后,与BamHI酶切并CIAP处理后的pUC19连接,然后转化DH5a,但是我的转化涂平板长得克隆很少。pUC19切之后跑胶回收条带清晰,没有弥散。感受态细胞验证没有问题,载体自连的话我用了56 ng pUC进行验证,长了几十个菌落。那么您认为是我的连接有问题还是转化有问题呢?
会不会是连接的量太少?我10ul的连接体系里面有30 ng的载体,150 ng左右的插入片段(2-5kb),16度16 h左右,然后全部涂板,但是只长了几十个克隆,太郁闷了。
7楼2013-04-01 19:29:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 逆天打酱油 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 00:25 by mibUvS8DDCwf
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 00:12 by vZfe6xYu34yj
[考博] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-14 23:33 by vZfe6xYu34yj
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 3/150 2026-09-14 23:21 by vZfe6xYu34yj
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-14 23:13 by vZfe6xYu34yj
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 3/150 2026-09-14 23:09 by vZfe6xYu34yj
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:45 by vZfe6xYu34yj
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 6/300 2026-09-14 22:37 by vZfe6xYu34yj
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 3/150 2026-09-14 22:33 by vZfe6xYu34yj
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 3/150 2026-09-14 22:24 by vZfe6xYu34yj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:12 by vZfe6xYu34yj
[考博] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:36 by vZfe6xYu34yj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:24 by vZfe6xYu34yj
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-14 21:21 by vZfe6xYu34yj
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +4 两三岁ss 2026-09-14 4/200 2026-09-14 20:29 by 班主任的同桌
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 15:09 by Aj1rhIDL5ixY
[基金申请] 求教各位大神:2026教育部人文社科青年基金项目何时公示呀? +5 云宴山人 2026-09-10 7/350 2026-09-14 12:11 by ecnu2013
[找工作] 浙江师范大学是怎么坑我的 +6 recruit123 2026-09-09 6/300 2026-09-14 12:00 by 萨仁其其格
[考博] 西北工业大学材料学院电化学传感与催化课题组招收2027年推免研究生、博士生、博士后 +3 马方园 2026-09-10 4/200 2026-09-14 09:29 by Chem张zz
信息提示
请填处理意见