24小时热门版块排行榜    

查看: 1209  |  回复: 6

逆天打酱油

金虫 (正式写手)

[求助] 已有基因组文库,求目的基因全序列的克隆子

已构建野生型大肠杆菌基因组文库,想获得含有全序列glnA 基因的克隆子,试验怎么设计?

初涉此类试验,求指教!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

逆天打酱油

金虫 (正式写手)

木有人咩。。顶一下。。。
2楼2013-03-02 09:09:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jingg1990

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

最近也要接触这个方面的试验,看看有回复的不
3楼2013-03-05 14:15:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

adatoua

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
zhangxingc: 金币+3, 应助指数+1, 鼓励交流 2013-03-05 17:03:42
大肠杆菌基因组不是报道过吗?想获得含有全序列glnA 基因的克隆子,直接pcr这个基因不就行了吗,为啥要建库?
4楼2013-03-05 16:45:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

逆天打酱油

金虫 (正式写手)

就是基于不知道基因碱基的情况下的方法研究,如果直接基因合成就木有意义鸟。。。
个人设想应该是要利用glnA的功能,转入大肠杆菌涂选择平板
目前是不知道怎么设置筛选。。。求指教
5楼2013-03-05 18:20:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

adatoua

铜虫 (正式写手)

你是准备考研的吧?
6楼2013-03-05 18:42:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaojuan1985

新虫 (正式写手)

您好,我想咨询你一下细菌基因文库构建的问题。
我的是一个革兰氏阳性菌,基因组经Sau 3AI不完全酶切后,与BamHI酶切并CIAP处理后的pUC19连接,然后转化DH5a,但是我的转化涂平板长得克隆很少。pUC19切之后跑胶回收条带清晰,没有弥散。感受态细胞验证没有问题,载体自连的话我用了56 ng pUC进行验证,长了几十个菌落。那么您认为是我的连接有问题还是转化有问题呢?
会不会是连接的量太少?我10ul的连接体系里面有30 ng的载体,150 ng左右的插入片段(2-5kb),16度16 h左右,然后全部涂板,但是只长了几十个克隆,太郁闷了。
7楼2013-04-01 19:29:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 逆天打酱油 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学调剂0703 +7 啊我我的 2026-03-11 7/350 2026-03-15 23:03 by 凌千颂111
[考研] 中科院材料273求调剂 +3 yzydy 2026-03-15 3/150 2026-03-15 21:15 by ms629
[考研] 0703化学调剂 ,六级已过,有科研经历 +4 曦熙兮 2026-03-15 4/200 2026-03-15 18:01 by JourneyLucky
[考研] 0856专硕279求调剂 +5 加油加油!? 2026-03-15 5/250 2026-03-15 11:58 by 2020015
[考研] 293求调剂 +5 上班不着吉 2026-03-09 5/250 2026-03-14 02:37 by JourneyLucky
[考研] 一志愿郑大070303,338分,求调剂 +4 dadawaf 2026-03-10 5/250 2026-03-14 01:20 by lsw010101
[考研] 招收0805(材料)调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
[考研] 材料371求调剂 +9 鳄鱼? 2026-03-11 11/550 2026-03-13 22:53 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工求调剂一志愿 985 总分 295 +8 dream…… 2026-03-12 8/400 2026-03-13 22:17 by 星空星月
[考研] 泣血叩求调剂恩,愿以丹心报师恩 +6 Iuruoh 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:06 by JourneyLucky
[考研] [0860]321分求调剂,ab区皆可 +4 宝贵热 2026-03-13 4/200 2026-03-13 22:01 by 星空星月
[考研] 26调剂/材料/英一数二/总分289/已过A区线 +6 步川酷紫123 2026-03-13 6/300 2026-03-13 21:59 by 星空星月
[考研] (081700)化学工程与技术-298分求调剂 +12 11啦啦啦 2026-03-11 35/1750 2026-03-13 21:25 by JourneyLucky
[考研] 【考研调剂求收留】 +3 Ceciilia 2026-03-11 3/150 2026-03-13 20:18 by JourneyLucky
[考研] 282分材料专业求调剂院校 +18 枫桥ZL 2026-03-09 25/1250 2026-03-13 10:47 by 白夜悠长
[考研] 材料专硕274一志愿陕西师范大学求调剂 +4 薛云鹏 2026-03-13 4/200 2026-03-13 10:40 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿河海大学085900土木水利专硕279求调剂不挑专业 +4 SunWwWwWw 2026-03-10 8/400 2026-03-13 02:23 by SunWwWwWw
[考研] 298求调剂 +3 Vv呀! 2026-03-10 3/150 2026-03-10 22:40 by 剑诗杜康
[考研] 求调剂材料专硕293 +6 段_(:з」∠)_ 2026-03-10 6/300 2026-03-10 18:22 by ms629
[考研] 一志愿:武汉理工,材料工程,英二数二 总分314 +3 2202020125 2026-03-10 4/200 2026-03-10 13:54 by xiongyaxuan
信息提示
请填处理意见