24小时热门版块排行榜    

查看: 1366  |  回复: 6

逆天打酱油

金虫 (正式写手)

[求助] 已有基因组文库,求目的基因全序列的克隆子

已构建野生型大肠杆菌基因组文库,想获得含有全序列glnA 基因的克隆子,试验怎么设计?

初涉此类试验,求指教!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

逆天打酱油

金虫 (正式写手)

木有人咩。。顶一下。。。
2楼2013-03-02 09:09:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jingg1990

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

最近也要接触这个方面的试验,看看有回复的不
3楼2013-03-05 14:15:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

adatoua

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
zhangxingc: 金币+3, 应助指数+1, 鼓励交流 2013-03-05 17:03:42
大肠杆菌基因组不是报道过吗?想获得含有全序列glnA 基因的克隆子,直接pcr这个基因不就行了吗,为啥要建库?
4楼2013-03-05 16:45:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

逆天打酱油

金虫 (正式写手)

就是基于不知道基因碱基的情况下的方法研究,如果直接基因合成就木有意义鸟。。。
个人设想应该是要利用glnA的功能,转入大肠杆菌涂选择平板
目前是不知道怎么设置筛选。。。求指教
5楼2013-03-05 18:20:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

adatoua

铜虫 (正式写手)

你是准备考研的吧?
6楼2013-03-05 18:42:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaojuan1985

新虫 (正式写手)

您好,我想咨询你一下细菌基因文库构建的问题。
我的是一个革兰氏阳性菌,基因组经Sau 3AI不完全酶切后,与BamHI酶切并CIAP处理后的pUC19连接,然后转化DH5a,但是我的转化涂平板长得克隆很少。pUC19切之后跑胶回收条带清晰,没有弥散。感受态细胞验证没有问题,载体自连的话我用了56 ng pUC进行验证,长了几十个菌落。那么您认为是我的连接有问题还是转化有问题呢?
会不会是连接的量太少?我10ul的连接体系里面有30 ng的载体,150 ng左右的插入片段(2-5kb),16度16 h左右,然后全部涂板,但是只长了几十个克隆,太郁闷了。
7楼2013-04-01 19:29:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 逆天打酱油 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 明天应该可查了!? +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 19/950 2026-08-25 17:57 by chick875
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +20 羊腰板 2026-08-21 23/1150 2026-08-25 16:34 by zsna
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 22/1100 2026-08-25 15:36 by 医学老男孩
[基金申请] 什么时候开奖? +12 CrisMessi 2026-08-18 13/650 2026-08-25 14:40 by ZJTJZ
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +3 苏东坡二世 2026-08-23 3/150 2026-08-25 10:35 by shisan1313
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +5 process2012 2026-08-23 7/350 2026-08-25 09:42 by huixian257
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +17 kkkl_v 2026-08-19 18/900 2026-08-25 09:41 by windflowerwy
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +7 炎黄贵胄 2026-08-22 8/400 2026-08-25 08:48 by ZJTJZ
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +25 yaoyewhu2008 2026-08-20 27/1350 2026-08-25 08:01 by Equinoxhua
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +21 koalala 2026-08-24 24/1200 2026-08-24 19:25 by 家与远方
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤?
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
信息提示
请填处理意见