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frish2008

铁虫 (初入文坛)

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[交流] 大片段基因组DNA克隆，有好方法的进来讨论下已有2人参与

我现在想从基因组里面克隆一段200kb的片段，应该要放到BAC里面。各位大神有没有什么好办法？我不想2K2K的扩PCR之后再搭接。

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1楼2013-10-23 17:42:01

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frish2008

铁虫 (初入文坛)

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引用回帖:

2楼: Originally posted by happy361 at 2013-10-24 19:57:05
建库，筛库。

怎么筛呢？我是要一段特定的序列。要怎么建库呢

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3楼2013-10-25 16:42:22

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木含24

木虫 (小有名气)

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★
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那应该还没有这技术吧，你想克隆特定的大片段吧？只有建库再设计引物筛选了。1建BAC文库，可以先小点试试（少挑点克隆） 2针对你的片段设计引物 3用引物在克隆里PCR 4扩增到你要的东西的克隆里就很可能有你要的大片段。

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4楼2013-10-25 17:00:09

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