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frish2008

铁虫 (初入文坛)

[交流] 大片段基因组DNA克隆,有好方法的进来讨论下 已有2人参与

我现在想从基因组里面克隆一段200kb的片段,应该要放到BAC里面。各位大神有没有什么好办法?我不想2K2K的扩PCR之后再搭接。
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happy361

木虫 (正式写手)

建库,筛库。
2楼2013-10-24 19:57:05
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frish2008

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by happy361 at 2013-10-24 19:57:05
建库,筛库。

怎么筛呢?我是要一段特定的序列。要怎么建库呢
3楼2013-10-25 16:42:22
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木含24

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
那应该还没有这技术吧,你想克隆特定的大片段吧?只有建库再设计引物筛选了。1建BAC文库,可以先小点试试(少挑点克隆)  2针对你的片段设计引物      3用引物在克隆里PCR     4扩增到你要的东西的克隆里就很可能有你要的大片段。

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2013-10-25 17:00:09
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