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sunny_andy金虫 (小有名气)
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[交流]
转化真菌后,怎么鉴定转化子?目的基因是从该真菌克隆出来的 已有2人参与
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从某真菌克隆出目的基因,将其置于强启动子下,然后再转化到该真菌本身,那么如何鉴定转化子呢? 转化真菌的话,转化的质粒全都是会整合到该真菌染色体上吗? 表达载体上有潮霉素抗性,我能否直接设计潮霉素基因的引物,用转化子的基因组DNA来扩增潮霉素,如果扩增出来就是转化成功,这种鉴定方法可行吗? ( 转化时有对照,以水代替质粒,对照平板没有长。) |
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CR法进行拟转化子检测,潮霉素抗性基因和目标基因都需要检测。对于LZ新导入的目标基因,可以设计一对跨启动子区和目标基因区的引物,这样就不会扩增出内源片段了。