应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】做真菌异源表达的表达序列是否可从基因组上扩
81/1返回列表
查看: 1409  |  回复: 7
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yuyan225

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】做真菌异源表达的表达序列是否可从基因组上扩

如题，最近即将开始做真菌异源表达，表达的基因也是来源于真菌，想问一下各位虫友，从基因组上扩的该片段能否连于表达载体，用于后续实验？（最近做的原核表达和酵母表达用的片段都是从cDNA上扩的，不知来源于基因组的片段与cDNA的片段用于表达，有何不同之处？望高手指点~~）
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼2011-04-14 16:24:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1986

铁杆木虫 (知名作家)
★
yuyan225(金币+1):谢谢参与
这个我真不知道，碰巧过来，给你顶帖吧。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-04-14 16:36:06
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuyan225

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 1986 at 2011-04-14 16:36:06:
这个我真不知道，碰巧过来，给你顶帖吧。

谢谢！
回复此楼
4楼2011-04-14 17:01:12
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★
yuyan225(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by yuyan225 at 2011-04-14 16:24:51:
如题，最近即将开始做真菌异源表达，表达的基因也是来源于真菌，想问一下各位虫友，从基因组上扩的该片段能否连于表达载体，用于后续实验？（最近做的原核表达和酵母表达用的片段都是从cDNA上扩的，不知来源于基因 ...

运气非常好的情况下可以！真核生物的基因是断裂基因，有内含子，你从基因组上直接扩增的好一般是含有内含子的，你克隆到载体上一般不能表达或者表达了也不是你要的东西。而cDNA不一样，是逆转录后剪接了的，只有编码序列，没有内含子
。所以你运气非常好的情况下，即扩增的基因正好没有内含子的情况下，可以这么做。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-04-14 17:56:17
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuyan225

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2011-04-14 17:56:17:
运气非常好的情况下可以！真核生物的基因是断裂基因，有内含子，你从基因组上直接扩增的好一般是含有内含子的，你克隆到载体上一般不能表达或者表达了也不是你要的东西。而cDNA不一样，是逆转录后剪接了的，只有 ...

最近正在头疼这个问题，非常感谢您，受教了~~
赞一下 回复此楼
6楼2011-04-15 16:10:10
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)
★
yuyan225(金币+1): 谢谢参与
即使有内含子，同是丝状真菌，一般可以识别的。
赞一下 回复此楼
7楼2012-07-11 13:00:33
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

新乡小树

捐助贵宾 (正式写手)
★
yuyan225(金币+1): 谢谢参与
去掉了内含子，生物翻译蛋白都是从mRNA开始的不加内含子的序列。
赞一下 回复此楼
8楼2014-03-22 00:10:42
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
liang88873楼
2011-04-14 16:37   回复  
yuyan225(金币+1):谢谢参与
祝福！
相关版块跳转 我要订阅楼主 yuyan225 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭