应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 真菌基因组DAN提取图片，求高人指点
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
211/3返回列表123下一页
查看: 3580  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

doudouxiong

铜虫 (小有名气)

[求助] 真菌基因组DAN提取图片，求高人指点

这是我提取的真菌基因组的DNA，因为材料量比较少的问题，因此采用液氮研磨，然后再用CTAB研磨，后用氯仿异戊醇抽提两次，然后用酒精洗，结果每次检测的图片都是这样，请问这是DNA降解还是蛋白质污染，如果是DNA降解，那么是我研磨的时候降解的吗？可能有那种情况就是研磨的时候把DNA研磨断了或者是破了导致的降解这一说法吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-10-16 15:53:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

蓝月望宁

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
西瓜(金币+4): Good！ 2011-10-19 18:36:31
我也来说说。
1.你的电泳图，MARker条带跑的很漂亮，可以排除电泳条件方面的原因。
2.点样孔发亮的原因是有机物和蛋白质等杂质，这个不是关键问题。
3.样品DNA条带弥散，几乎布满整个泳道，说明DNA严重降解，这才是问题关键。
个人愚见。所有实验用品灭菌，除去核酸酶，操作过程中在冰上进行，操作过程尽量轻柔。
你提取DNA的方法我没用过，仅仅根据我自己用的方法及应验给你提的建议，仅供参考！
赞一下(3人) 回复此楼
坚持，一秒钟，就离，成功，近一步！
12楼2011-10-19 09:54:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

doudouxiong

铜虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by honjie at 2011-10-17 10:12:50:
加蛋白酶K60度处理1小时看看，看你的图片有两个泳道有堵孔现象，可能是蛋白，另外，DNA有讲解的现象，建议用SDS破膜剂试试看，减少研磨次数和时间，量若不多，加SDS破膜后反复吹打即可，未必要研磨。

不好意思，本来想给你金币的，结果计算错了，送一段花给你吧
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2011-10-18 23:56:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

liukgg

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
amisking(金币+3): 鼓励应助发帖！ 2011-10-16 21:27:32
doudouxiong(金币+3): 我做的是锈菌的夏孢子，孢子壁相当厚，很难磨破的，哎，悲剧的 2011-10-18 23:55:25
蛋白污染的可能性大一些，因为点样孔那都有污染的情况发生。一般来说液氮研磨时应该不会将DNA破坏。试一下别的方法。《6种链霉菌基因组DNA提取方法比较》这篇文献里面讲了几种方法，可以试一下，我以前也是做的链霉菌的，没做过真菌的，但它们的相似度还是挺高的。
赞一下(1人) 回复此楼
山水凤凰
2楼2011-10-16 18:27:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

547star

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
wanhscn(金币+1): 鼓励交流 2011-10-17 18:49:30
doudouxiong(金币+2): 2011-10-18 23:55:33
抽提前穿插加SDS和蛋白酶K处理看看。
赞一下(1人) 回复此楼
为什么
3楼2011-10-17 01:50:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

怎么都行

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

遇上这种情况还不如多花点钱用试剂盒呢
赞一下 回复此楼
4楼2011-10-17 02:11:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

doudouxiong

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 怎么都行 at 2011-10-17 02:11:30:
遇上这种情况还不如多花点钱用试剂盒呢

老师不给买
回复此楼
5楼2011-10-17 08:28:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

honjie

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励交流 2011-10-17 18:49:14
加蛋白酶K60度处理1小时看看，看你的图片有两个泳道有堵孔现象，可能是蛋白，另外，DNA有讲解的现象，建议用SDS破膜剂试试看，减少研磨次数和时间，量若不多，加SDS破膜后反复吹打即可，未必要研磨。
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

doudouxiong
6楼2011-10-17 10:12:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

另一个天堂

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励交流 2011-10-17 18:49:01
doudouxiong(金币+5): 2011-10-18 23:54:18
2个原因：蛋白质污染或者DNA降解
抽提时可以用酚：氯仿:异戊醇抽屉一下，防止蛋白质污染。最后再用RNase处理。如果还是这样的结果，那就是DNA降解了
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

doudouxiong
7楼2011-10-17 11:56:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ybs007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-10-19 18:35:30
我以前提过酵母基因组 用氯化苄法   你可以参考参考
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

doudouxiong
平生我自知
8楼2011-10-17 18:25:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

doudouxiong

铜虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by 另一个天堂 at 2011-10-17 11:56:53:
2个原因：蛋白质污染或者DNA降解
抽提时可以用酚：氯仿:异戊醇抽屉一下，防止蛋白质污染。最后再用RNase处理。如果还是这样的结果，那就是DNA降解了

没有金币了，送朵鲜花给你吧
赞一下 回复此楼
10楼2011-10-18 23:57:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 doudouxiong 的主题更新
211/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 313求调剂 +4 海日海日 2026-04-04 6/300 2026-04-05 10:54 by xiayan13521
[考研] 求调剂 +4 晟功? 2026-04-03 4/200 2026-04-04 21:58 by hemengdong
[考研] 315求调剂 +13 小羊小羊_ 2026-04-02 14/700 2026-04-04 20:30 by 蓝云思雨
[考研] 化学308分调剂 +23 你好明天你好 2026-03-30 24/1200 2026-04-04 18:29 by macy2011
[考研] 297求调剂 +11 ljy20040718！ 2026-04-03 13/650 2026-04-04 09:23 by 来看流星雨10
[考研] 数二英二348求调剂 +4 hxdzj1 2026-04-03 5/250 2026-04-03 21:25 by zhq0425
[考研] 286求调剂 +8 lim0922 2026-04-02 8/400 2026-04-03 20:19 by rzh123456
[考研] 303求调剂 +9 DLkz1314. 2026-03-30 9/450 2026-04-03 18:34 by ls刘帅
[考研] 289-求调剂 +4 这里是_ 2026-04-03 4/200 2026-04-03 14:23 by 1753564080
[考研] 085600，320分求调剂 +6 大馋小子 2026-04-02 6/300 2026-04-02 21:54 by dongzh2009
[考研] 农学考研求调剂 +3 dkdkxm 2026-04-01 3/150 2026-04-02 16:04 by wangjagri
[考研] 化学工程专硕324分，一志愿中国矿业大学求调剂 +7 耿耿1314 2026-04-01 7/350 2026-04-02 07:40 by 尚水阁主
[考博] 26年申博 +3 staryer 2026-03-30 4/200 2026-04-01 23:21 by ai4pharm
[考研] 279求调剂 +7 莫xiao 2026-04-01 7/350 2026-04-01 22:05 by 客尔美德
[考研] 085600，320分求调剂 +5 大馋小子 2026-04-01 6/300 2026-04-01 19:40 by 唐沐儿
[考研] 一志愿西安交大材料学硕（英一数二）347，求调剂到高分子/材料相关专业 +7 zju51 2026-03-31 9/450 2026-04-01 19:35 by CFQZAFU
[考研] 301求调剂 +8 axibli 2026-04-01 8/400 2026-04-01 09:51 by 我的船我的海
[考研] 一志愿 南京航空航天大学 ，080500材料科学与工程学硕 +10 @taotao 2026-03-31 11/550 2026-04-01 09:43 by xiayizhi
[考研] 复试调剂 +7 双马尾痞老板2 2026-03-31 7/350 2026-03-31 19:49 by Dyhoer
[考研] 323分 食品与营养调剂 +3 嘿ooo 2026-03-31 3/150 2026-03-31 09:38 by longlotian
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭