24小时热门版块排行榜    

查看: 1775  |  回复: 8

melodyxin

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】急!关于外源基因在丝状真菌中的融合表达 已有2人参与

如题,看了一些文献,发现外源基因往往采用融合表达的策略。而且许多研究往往会选用Pcbh1强启动子,后面加上某个同源基因(比如木聚糖酶基因XynA)的信号肽和部分前导序列(CBD和linker序列),然后再连接外源基因与之融合表达。

我想请教一下各位,关于这里载体构建方式,木聚糖酶的信号肽ss,可否换成Pcbh1下游的ss呢?也就是说,融合表达策略中选用的信号肽是否一定要求是融合序列的信号肽,而不能替换成启动子下游的信号肽?

亦即:

Pcbh1-XynA(ss-CBD-linker)-目的基因-Tcbh1
能否换成:
Pcbh1-ss-XynA(CBD-linker)-目的基因-Tcbh1

[ Last edited by melodyxin on 2010-6-19 at 11:35 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

melodyxin

铜虫 (小有名气)

我再说明一下,主要的问题在于信号肽。
2楼2010-06-18 17:48:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

melodyxin

铜虫 (小有名气)

很需要大家的帮助!求交流啊
3楼2010-06-18 20:15:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anlewo7777

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lmzxcom1(金币+1):积极交流 2010-06-19 09:21:33
我认为只看表达的话可能可以,但好多蛋白加信号肽是为了表达之后的不被内部降解和利于分泌出菌体,单丛这个启动子信号肽能否用来说,我觉得要看它是不是宿主来源的启动子,否则宿主不能识别外源信号肽,还是起不到对融合蛋白的保护和帮助分泌作用.
了解不多,仅供参考!
4楼2010-06-19 08:04:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

melodyxin

铜虫 (小有名气)

嗯,我个人觉得启动子没问题,我只是对于同样是宿主来源的信号肽存有疑问。在融合表达时,应该选用启动子下游的信号肽,还是融合序列上游的信号肽?
这两者都是宿主来源。
5楼2010-06-19 11:34:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anlewo7777

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~ 2010-06-20 11:29:14
我不知道你的启动子是调控什么蛋白的表达的,如果你有资料,可以比较一下这两个蛋白的量、稳定性和分泌特性选择一下,个人认为用融合序列的保险一些,毕竟那是生物里原来的序列。这样做如果不成,那就可能是启动子和之后序列的连接有问题,这在另一个方案里也会有,用你倾向的方案,如果不成,你就不知道是什么原因。
6楼2010-06-20 08:17:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

melodyxin

铜虫 (小有名气)

dhd997:最好引用回复,不然你咨询的人看不到。 2010-06-20 11:10:07
嗯,这个启动子是丝状真菌里常用的强启动子,其分泌的蛋白占里氏木霉分泌总蛋白的60%以上。
对了,我也倾向于方案1,用融合序列同源的信号肽。

另外我想再问一下,真菌的信号肽功能差别会很大吗?
7楼2010-06-20 10:41:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anlewo7777

木虫 (正式写手)

这个没有研究过,不过序列不一样应该是有区别的吧
8楼2010-06-21 08:33:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

melodyxin

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by anlewo7777 at 2010-06-21 08:33:27:
这个没有研究过,不过序列不一样应该是有区别的吧

哦!这样,好的,那我还是试试看。
9楼2010-06-21 11:53:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 melodyxin 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧? +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +5 Soliloquy_Q 2026-02-28 8/400 2026-02-28 23:36 by xyx2012xyx
[考研] 化工专硕348,一志愿985求调剂 +4 弗格个 2026-02-28 6/300 2026-02-28 22:00 by wang_dand
[考研] 290求调剂 +5 材料专硕调剂; 2026-02-28 6/300 2026-02-28 21:40 by gaoxiaoniuma
[考博] 26申博 +4 想申博! 2026-02-26 4/200 2026-02-28 21:37 by limorning
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
[考研] 311求调剂 +8 南迦720 2026-02-28 8/400 2026-02-28 21:30 by gaoxiaoniuma
[考研] 求调剂 +4 repeatt?t 2026-02-28 4/200 2026-02-28 21:16 by gaoxiaoniuma
[考研] 高分子化学与物理调剂 +4 好好好1233 2026-02-28 7/350 2026-02-28 20:42 by 好好好1233
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[考研] 0856材料求调剂 +10 hyf hyf hyf 2026-02-28 11/550 2026-02-28 18:50 by 无际的草原
[考研] 285求调剂 +5 满头大汗的学生 2026-02-28 5/250 2026-02-28 18:10 by 材料专硕调剂;
[考博] 博士自荐 +3 kkluvs 2026-02-28 3/150 2026-02-28 16:59 by StarAura
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +4 礼堂丁真258 2026-02-28 6/300 2026-02-28 16:18 by 求调剂zz
[考研] 寻找调剂 +3 LYidhsjabdj 2026-02-28 3/150 2026-02-28 12:59 by miniwendy
[基金申请] 面上可以超过30页吧? +12 阿拉贡aragon 2026-02-22 13/650 2026-02-26 22:09 by Hahaxia
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
请填处理意见