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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】急！关于外源基因在丝状真菌中的融合表达
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melodyxin

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】急！关于外源基因在丝状真菌中的融合表达 已有2人参与

如题，看了一些文献，发现外源基因往往采用融合表达的策略。而且许多研究往往会选用Pcbh1强启动子，后面加上某个同源基因（比如木聚糖酶基因XynA）的信号肽和部分前导序列（CBD和linker序列），然后再连接外源基因与之融合表达。

我想请教一下各位，关于这里载体构建方式，木聚糖酶的信号肽ss，可否换成Pcbh1下游的ss呢？也就是说，融合表达策略中选用的信号肽是否一定要求是融合序列的信号肽，而不能替换成启动子下游的信号肽？

亦即：

Pcbh1-XynA（ss-CBD-linker）-目的基因-Tcbh1
能否换成：
Pcbh1-ss-XynA（CBD-linker）-目的基因-Tcbh1

[ Last edited by melodyxin on 2010-6-19 at 11:35 ]
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1楼 2010-06-18 17:47:38
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anlewo7777

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lmzxcom1(金币+1):积极交流 2010-06-19 09:21:33
我认为只看表达的话可能可以,但好多蛋白加信号肽是为了表达之后的不被内部降解和利于分泌出菌体,单丛这个启动子信号肽能否用来说,我觉得要看它是不是宿主来源的启动子,否则宿主不能识别外源信号肽,还是起不到对融合蛋白的保护和帮助分泌作用.
了解不多,仅供参考!
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4楼2010-06-19 08:04:17
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melodyxin

铜虫 (小有名气)
我再说明一下，主要的问题在于信号肽。
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2楼2010-06-18 17:48:02
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melodyxin

铜虫 (小有名气)
很需要大家的帮助！求交流啊
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3楼2010-06-18 20:15:42
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melodyxin

铜虫 (小有名气)
嗯，我个人觉得启动子没问题，我只是对于同样是宿主来源的信号肽存有疑问。在融合表达时，应该选用启动子下游的信号肽，还是融合序列上游的信号肽？
这两者都是宿主来源。
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5楼2010-06-19 11:34:27
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