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[求助]
求双酶切连接、载体构建等信息~ 已有2人参与
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| 最近学习双酶切，但太泛了，完全没有头绪，如何在引物两端加酶切位点也一头雾水，如何选择载体？如何构建载体？？等等 |
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送红花一朵
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8楼2014-01-06 20:00:11
lvbobo823
铁杆木虫 (正式写手)
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2楼2014-01-02 08:57:09
sxxuan
金虫 (著名写手)
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【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-01-02 12:09:35
永远一片天: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-01-03 21:53:01
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永远一片天: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-01-03 21:53:01
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你可以看看pET原核表达手册，里面讲了很多理论知识，虽然主要是原核表达载体方面的构建，但也可以满足你的需求。 另外不知道你做双酶切构建载体是用于哪一方面，所以是不能具体地和你讲怎么做到。不管怎样，选择酶切位点或者载体构建，都是和你的实验目的以及序列相关。酶切位点不能是目的序列里面有的，做上下游加入酶切位点的方向要与载体的方向一致。 很多酶的厂家，例如takara/neb/fermentas等网站上都有相关的技术手册，可以参考。 |
3楼2014-01-02 09:28:36
4楼2014-01-03 21:59:51
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