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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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kxmytmy

银虫 (正式写手)


[求助] 求助 反转录 已有2人参与

想请教一下各位,是关于做木本植物根相关基因的实验:根的RNA提取之后检测质量很好,可是做完反转之后跑PCR检测却是什么都没有,是什么原因呢?谢谢大家了
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gyesang

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【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用内参基因比如Actin,GAPDH,Ubiquitin这类基因的引物测试了吗?

你说“可是做完反转之后跑PCR检测却是什么都没有”你PCR什么基因的呢?表达丰度如何?
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2013-12-19 20:43:16
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查看全部 7 个回答

遥远的山那边

新虫 (初入文坛)

请问您用的什么方法提取的根RNA?包括什么牌子的产品!提取后的RNA浓度怎么样?
2楼2013-12-19 20:07:47
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kxmytmy

银虫 (正式写手)


引用回帖:
3楼: Originally posted by gyesang at 2013-12-19 20:43:16
用内参基因比如Actin,GAPDH,Ubiquitin这类基因的引物测试了吗?

你说“可是做完反转之后跑PCR检测却是什么都没有”你PCR什么基因的呢?表达丰度如何?

我是反转之后拿Actin检测的时候什么都没有
4楼2013-12-19 21:31:46
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Dr.G

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+5, 非常好! 2013-12-20 11:48:03
gyesang: 回帖置顶 2013-12-20 11:48:08
你是逆转录后,以cDNA为模板PCR,结果扩不出来条带
1.逆转录过程是否有问题,cDNA模板浓度会不会太低了
2.PCR条件设置OK吗?模板要是没有问题,把退火温度降低2度试一试
3.能不能多给点你的实验条件信息
5楼2013-12-19 21:55:21
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