应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助我反转录跑胶结果
71/1返回列表
查看: 4848  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看

wallace13145

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助我反转录跑胶结果

请问大家我检测反转录成功与否为什么目的条带下还有个微弱的条带？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-07-18 16:18:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

mengfei8336: MolEPI+1, 多谢关注。 2012-07-18 21:13:12
引用回帖:
2楼: Originally posted by lishenchi at 2012-07-18 20:05:27
楼主我想请教一个问题，一直不太懂。CDNA理论上应该多大啊？全都是一样大吗？还是有好多好多的mRNA,所以逆转录应该出来好多大小的cDNA,所以应该有好多好多条带
？？这个问题一直困扰我

mRNA各种大小都有，cDNA也是一样的。
反转录一般有三种引物：
1.Oligo dT可以结合mRNA的多聚A尾巴，用来反转录所有mRNA；
2.随机引物，可结合到各种RNA上，可以反转录几乎所有的RNA。
上述两种引物的反转录产物包含各种大小的片段，而且浓度都不会太高（跟PCR产物没得比的哈），所以跑胶的话是弥散整个泳道的淡淡一片。
3.基因特异的引物，原理类似PCR引物，只反转录特定的片段，这种反转录的产物量就更少了，跑胶的话几乎是看不到东西的。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2012-07-18 21:08:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

lishenchi

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主我想请教一个问题，一直不太懂。CDNA理论上应该多大啊？全都是一样大吗？还是有好多好多的mRNA,所以逆转录应该出来好多大小的cDNA,所以应该有好多好多条带
？？这个问题一直困扰我
赞一下 回复此楼
2楼2012-07-18 20:05:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jl860822

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
RT之后又检测的必要吗？mRNA的量很少的，提完总RNA之后，跑胶根本就看不到mRNA，你做完RT后怎么能跑出来条带呢？我很纳闷
赞一下 回复此楼
3楼2012-07-18 20:33:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xw19880905

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-07-19 15:16:32
你这个是反转后做的actin检测吧，检测结果比较好，应该可以做下一步，下面那个隐隐条带应该是二聚体，如果定量时溶解曲线没问题那就没问题。
赞一下 回复此楼
5楼2012-07-19 11:37:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wallace13145

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jl860822 at 2012-07-18 20:33:06
RT之后又检测的必要吗？mRNA的量很少的，提完总RNA之后，跑胶根本就看不到mRNA，你做完RT后怎么能跑出来条带呢？我很纳闷

不是检测rna的，是跑cdna
赞一下 回复此楼
6楼2012-07-20 15:06:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jl860822

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

mRNA的量很小，所以我认为cDNA的量也同样不足以检测到
赞一下 回复此楼
7楼2012-07-20 15:47:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wallace13145 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703 物理化学调剂 +3 我可以上岸的对� 2026-03-13 5/250 2026-03-16 10:50 by 我可以上岸的对�
[考研] 0703化学调剂 290分有科研经历，论文在投 +7 腻腻gk 2026-03-14 7/350 2026-03-16 10:12 by houyaoxu
[考研] 0856求调剂 +3 刘梦微 2026-03-15 3/150 2026-03-16 10:00 by houyaoxu
[考研] 材料专硕306英一数二 +3 z1z2z3879 2026-03-16 3/150 2026-03-16 09:19 by Demonsssss
[考研] 东南大学364求调剂 +4 JasonYuiui 2026-03-15 4/200 2026-03-16 08:36 by Linda Hu
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考研] 080500，材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[考研] 328求调剂 +3 5201314Lsy！ 2026-03-13 6/300 2026-03-14 15:31 by hyswxzs
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-03-13 4/200 2026-03-14 08:37 by zhukairuo
[考研] 求调剂 +3 清风问长安 2026-03-09 3/150 2026-03-14 02:15 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +6 yfihxh 2026-03-09 6/300 2026-03-14 01:18 by JourneyLucky
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:47 by JourneyLucky
[考研] 0856材料与化工309分求调剂 +6 ZyZy…… 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:38 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工求调剂一志愿 985 总分 295 +8 dream…… 2026-03-12 8/400 2026-03-13 22:17 by 星空星月
[考研] 0856材料与化工301求调剂 +5 奕束光 2026-03-13 5/250 2026-03-13 22:00 by 星空星月
[考研] 0703化学一志愿211 总分320求调剂 +5 玛卡巴卡啊哈 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:40 by JourneyLucky
[考研] 281求调剂 +9 Koxui 2026-03-12 11/550 2026-03-13 20:50 by Koxui
[考研] 求调剂 +7 18880831720 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:10 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕350 求调剂 +4 王金科 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:02 by ruiyingmiao
[考研] 数二英二309分请求调剂 +3 dtdxzxx 2026-03-09 4/200 2026-03-09 19:56 by yuningshan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭