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西瓜

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【答案】应助回帖

mengfei8336: MolEPI+1, 多谢关注。 2012-07-18 21:13:12

引用回帖:

2楼: Originally posted by lishenchi at 2012-07-18 20:05:27
楼主我想请教一个问题，一直不太懂。CDNA理论上应该多大啊？全都是一样大吗？还是有好多好多的mRNA,所以逆转录应该出来好多大小的cDNA,所以应该有好多好多条带
？？这个问题一直困扰我

mRNA各种大小都有，cDNA也是一样的。
反转录一般有三种引物：
1.Oligo dT可以结合mRNA的多聚A尾巴，用来反转录所有mRNA；
2.随机引物，可结合到各种RNA上，可以反转录几乎所有的RNA。
上述两种引物的反转录产物包含各种大小的片段，而且浓度都不会太高（跟PCR产物没得比的哈），所以跑胶的话是弥散整个泳道的淡淡一片。
3.基因特异的引物，原理类似PCR引物，只反转录特定的片段，这种反转录的产物量就更少了，跑胶的话几乎是看不到东西的。

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4楼2012-07-18 21:08:10

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