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新虫 (初入文坛)

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[交流] Promega SV提RNA 已有5人参与

大家好,想请教大家同样的问题,虽然以前有很多人问过关于RNA提取的问题了, 我也看了,也在不断改进,可是出来的结果总是不理想,有时候好有时候不好,很不稳定,
虽然OD值都还好,但是跑出来的条带就是不清楚,降解仍然很严重,根本不能做下游实验,
有哪位虫虫也在用这个试剂盒的吗?能提点什么意见吗?特别是研磨这个过程,到底如何操作才能避免降解.具体过程中就注意什么呢.
求助迫切中.......
希望好人们赶紧告诉我吧...快被RNA整崩溃了......
因为是新手,所以金币不多呢.但真的希望大家帮帮忙.........

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1楼 2011-10-31 16:10:08

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分子生物化学

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不一定要严格按照说明书来，有些时候是可以变通的，但是你必须要了解试剂盒的原理。
提RNA的时候要快，尽量避免RNA酶。要仔细检查你的实验过程，说不准你什么时候不注意就让整个实验失败了。

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做实验有失败才能学到东西

5楼2011-11-01 15:43:44

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5楼: Originally posted by 分子生物化学 at 2011-11-01 15:43:44:
不一定要严格按照说明书来，有些时候是可以变通的，但是你必须要了解试剂盒的原理。
提RNA的时候要快，尽量避免RNA酶。要仔细检查你的实验过程，说不准你什么时候不注意就让整个实验失败了。

嗯。你说得很对，我就是第一次做没看说明书，结果出来28和18S都不错，所以没想那么多就继续做，做第三次就不行了，跑胶的时候直接啥也没有，只能看到一团亮亮的东西，他们都说是降解，可是问题具体在哪里，师兄也不清楚，我们实验室才开始做这方面的。所以都不是很清楚。。。。我自己又差劲。。。只能和你们求助了呢。。。。谢谢你们哈。。。。