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xls198926

新虫 (初入文坛)

[交流] Promega SV提RNA 已有5人参与

大家好,想请教大家同样的问题,虽然 以前有很多人问过关于RNA提取的问题了, 我也看了,也在不断改进,可是出来的结果总是不理想,有时候好有时候不好,很不稳定,
虽然OD值都还好,但是跑出来的条带就是不清楚,降解仍然很严重,根本不能做下游实验,
有哪位虫虫也在用这个试剂盒的吗?能提点什么意见吗?特别是研磨这个过程,到底如何操作才能避免降解.具体过程中就注意什么呢.
求助迫切中.......
希望好人们赶紧告诉我吧...快被RNA整崩溃了......
因为是新手,所以金币不多呢.但真的希望大家帮帮忙.........
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xls198926

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 分子生物化学 at 2011-11-01 15:43:44:
不一定要严格按照说明书来,有些时候是可以变通的,但是你必须要了解试剂盒的原理。
提RNA的时候要快,尽量避免RNA酶。要仔细检查你的实验过程,说不准你什么时候不注意就让整个实验失败了。

嗯。你说得很对,我就是第一次做没看说明书,结果出来28和18S都不错,所以没想那么多就继续做,做第三次就不行了,跑胶的时候直接啥也没有,只能看到一团亮亮的东西,他们都说是降解,可是问题具体在哪里,师兄也不清楚,我们实验室才开始做这方面的。所以都不是很清楚。。。。我自己又差劲。。。只能和你们求助了呢。。。。谢谢你们哈。。。。
7楼2011-11-01 21:50:26
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rodickholm

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
wanhscn(金币+2): 鼓励应助回帖! 2011-11-02 11:38:30
严格来说,比值OK就可以进行下游实验了,电泳有其他很多因素影响的,研磨就是快,尽量磨碎。组织要尽量新鲜。用得起SV提RNA,实验室不错啊。
2楼2011-11-01 09:03:04
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xls198926

新虫 (初入文坛)

有时候跑出来就是这个样子。。。有时候也不会,问哈虫子们做实验会遇到这种情况吗?一下子可以,一下子不行的啊。。。。


3楼2011-11-01 11:40:53
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jeff_jin

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
辛苦了!!!!!!
4楼2011-11-01 14:30:35
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