应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助 反转录
71/1返回列表
查看: 1142  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

kxmytmy

银虫 (正式写手)

[求助] 求助 反转录 已有2人参与

想请教一下各位，是关于做木本植物根相关基因的实验：根的RNA提取之后检测质量很好，可是做完反转之后跑PCR检测却是什么都没有，是什么原因呢？谢谢大家了
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-12-19 16:11:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

Dr.G

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+5, 非常好！ 2013-12-20 11:48:03
gyesang: 回帖置顶 2013-12-20 11:48:08
你是逆转录后，以cDNA为模板PCR，结果扩不出来条带
1.逆转录过程是否有问题，cDNA模板浓度会不会太低了
2.PCR条件设置OK吗？模板要是没有问题，把退火温度降低2度试一试
3.能不能多给点你的实验条件信息
赞一下 回复此楼
5楼2013-12-19 21:55:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

遥远的山那边

新虫 (初入文坛)
请问您用的什么方法提取的根RNA？包括什么牌子的产品！提取后的RNA浓度怎么样？
赞一下 回复此楼
2楼2013-12-19 20:07:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用内参基因比如Actin，GAPDH，Ubiquitin这类基因的引物测试了吗？

你说“可是做完反转之后跑PCR检测却是什么都没有”你PCR什么基因的呢？表达丰度如何？
赞一下 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2013-12-19 20:43:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kxmytmy

银虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by gyesang at 2013-12-19 20:43:16
用内参基因比如Actin，GAPDH，Ubiquitin这类基因的引物测试了吗？

你说“可是做完反转之后跑PCR检测却是什么都没有”你PCR什么基因的呢？表达丰度如何？

我是反转之后拿Actin检测的时候什么都没有
赞一下 回复此楼
4楼2013-12-19 21:31:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kxmytmy

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 遥远的山那边 at 2013-12-19 20:07:47
请问您用的什么方法提取的根RNA？包括什么牌子的产品！提取后的RNA浓度怎么样？

是用试剂盒提取的，RNA浓度没有问题挺好的，大都在一千多ng
赞一下 回复此楼
6楼2013-12-19 22:08:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kxmytmy

银虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by Dr.G at 2013-12-19 21:55:21
你是逆转录后，以cDNA为模板PCR，结果扩不出来条带
1.逆转录过程是否有问题，cDNA模板浓度会不会太低了
2.PCR条件设置OK吗？模板要是没有问题，把退火温度降低2度试一试
3.能不能多给点你的实验条件信息

您说的这个应该不会有问题，条件我都试过的，并且所用的引物及试剂都是比人做成功之后我拿过来用的。我是实在不知道是什么原因了
赞一下 回复此楼
7楼2013-12-19 22:10:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 kxmytmy 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +19 羊腰板 2026-08-21 22/1100 2026-08-25 10:38 by popular289
[教师之家] 导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！ +3 苏东坡二世 2026-08-23 3/150 2026-08-25 10:35 by shisan1313
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +5 process2012 2026-08-23 7/350 2026-08-25 09:42 by huixian257
[基金申请] 我面上完蛋了 +13 且听虎啸 2026-08-20 14/700 2026-08-25 09:10 by mrkang
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +25 yaoyewhu2008 2026-08-20 27/1350 2026-08-25 08:01 by Equinoxhua
[基金申请] 明天应该可查了！？ +5 chengyan1220 2026-08-23 5/250 2026-08-24 23:28 by 我4大白菜
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +7 图啦图啦 2026-08-24 8/400 2026-08-24 22:00 by maomao_da
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤？
[基金申请] 估计是周四 +4 archvillain 2026-08-18 4/200 2026-08-24 13:53 by zzuzxg
[基金申请] 朋友圈看到的 +7 wangzilk 2026-08-18 9/450 2026-08-24 10:50 by cmrandy
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 17/850 2026-08-24 10:20 by echo8914667
[基金申请] 什么时候开奖？ +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗？ +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭