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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒测序 pcr产物ta克隆后送去测序 为什么要测双向
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橘子很圆

银虫 (小有名气)

[求助] 质粒测序 pcr产物ta克隆后送去测序 为什么要测双向

pcr序列要表达蛋白的
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1楼 2013-12-08 19:49:43
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-08 21:17:18
橘子很圆: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-12-10 16:14:19
是否要测双向，取决于你克隆进的基因序列的长度，如果你的基因序列在700-800以内的话，完全不用双向测序，因为一个测序反应就能把你的基因序列覆盖了，如果你的序列很长，一个反应可能会测不通你的就基因，所以就需要双向测序，如果你的基因大于1500以上，还可能需要从中间设计引物继续测序
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2楼2013-12-08 20:36:16
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三蛰

铜虫 (小有名气)
楼上说的对，应该你的目的片段在1000以上了。另外，我建议，不同时间给他们同一份样品两次，分别测，然后对比一下。。。我们实验室就出现过同样的样品，分成两次给他们，测得结果出入很大。找个信誉和能力好点的公司。
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我不会！
3楼2013-12-08 22:53:12
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lm2570

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-12-08 20:36:16
是否要测双向，取决于你克隆进的基因序列的长度，如果你的基因序列在700-800以内的话，完全不用双向测序，因为一个测序反应就能把你的基因序列覆盖了，如果你的序列很长，一个反应可能会测不通你的就基因，所以就需 ...

此楼正解，是否要测双向，取决于你克隆进的基因序列的长度
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4楼2013-12-08 23:13:28
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zz53qq53

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
主要取决于序列长度（大于800测双向）；为求测准可以双向啊
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5楼2013-12-09 18:12:57
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橘子很圆

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-12-08 20:36:16
是否要测双向，取决于你克隆进的基因序列的长度，如果你的基因序列在700-800以内的话，完全不用双向测序，因为一个测序反应就能把你的基因序列覆盖了，如果你的序列很长，一个反应可能会测不通你的就基因，所以就需 ...

我的序列有1400  
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6楼2013-12-10 16:14:07
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gyesang

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引用回帖:
6楼: Originally posted by 橘子很圆 at 2013-12-10 16:14:07
我的序列有1400  ...

所以需要从两头测，两个测序反应足够了
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
7楼2013-12-10 16:28:11
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