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橘子很圆

银虫 (小有名气)

[求助] 质粒测序 pcr产物ta克隆后送去测序 为什么要测双向

pcr序列要表达蛋白的
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gyesang

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2013-12-08 21:17:18
橘子很圆: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-12-10 16:14:19
是否要测双向,取决于你克隆进的基因序列的长度,如果你的基因序列在700-800以内的话,完全不用双向测序,因为一个测序反应就能把你的基因序列覆盖了,如果你的序列很长,一个反应可能会测不通你的就基因,所以就需要双向测序,如果你的基因大于1500以上,还可能需要从中间设计引物继续测序
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-12-08 20:36:16
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三蛰

铜虫 (小有名气)

楼上说的对,应该你的目的片段在1000以上了。另外,我建议,不同时间给他们同一份样品两次,分别测,然后对比一下。。。我们实验室就出现过同样的样品,分成两次给他们,测得结果出入很大。找个信誉和能力好点的公司。
我不会!
3楼2013-12-08 22:53:12
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lm2570

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-12-08 20:36:16
是否要测双向,取决于你克隆进的基因序列的长度,如果你的基因序列在700-800以内的话,完全不用双向测序,因为一个测序反应就能把你的基因序列覆盖了,如果你的序列很长,一个反应可能会测不通你的就基因,所以就需 ...

此楼正解,是否要测双向,取决于你克隆进的基因序列的长度
4楼2013-12-08 23:13:28
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zz53qq53

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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主要取决于序列长度(大于800测双向);为求测准可以双向啊
5楼2013-12-09 18:12:57
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橘子很圆

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-12-08 20:36:16
是否要测双向,取决于你克隆进的基因序列的长度,如果你的基因序列在700-800以内的话,完全不用双向测序,因为一个测序反应就能把你的基因序列覆盖了,如果你的序列很长,一个反应可能会测不通你的就基因,所以就需 ...

我的序列有1400  
6楼2013-12-10 16:14:07
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gyesang

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引用回帖:
6楼: Originally posted by 橘子很圆 at 2013-12-10 16:14:07
我的序列有1400  ...

所以需要从两头测,两个测序反应足够了
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
7楼2013-12-10 16:28:11
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