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柠檬可乐星

新虫 (小有名气)


[交流] 为什么测得的序列在NCBI里blast不出来?

求指点啊:我扩了A属(用的是A属下的单一种做的)的18S、28S和ITS(ITS1+5.8S+ITS2)这三段基因,得到序列后到NCBI里blast。
结果:18S比对出了A属的信息;
           28S没有比对出A属,而是比对出B属的信息,已知A、B是一个科的
           ITS blast后显示:No significant similarity found。
之前怀疑是测序出错,换公司把28S和ITS 重测之后,测序结果98%一致,当然blast结果也一样。
后又查文献,还没有明确找到A属有做28S和ITS的,B属做28S的很多。这三段基因在我所做的这个门、不同属都有做的,但每个属可能只做其中某几段(当然可能是我文献查的不全)。
鉴于我上述情况,求各位高手指点可能的原因是什么啊?
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Davidzjy

铁杆木虫 (正式写手)


★ ★ ★
柠檬可乐星(金币+1): 谢谢参与
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-12-05 21:01:41
既然A属的28S没人做过明确的结果
那就把blast的分值降下来
另外不要用高级blast 就用最基本的那个BLASTn
后面那些blast要利用到进一步的annotation 而且数据库有限
你这个连基本序列都没人做过 就不要用什么mega之类的了
4楼2013-12-05 09:40:41
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普通回帖

lm2570

木虫 (正式写手)


★ ★
柠檬可乐星(金币+1): 谢谢参与
gyesang: 金币+1, 鼓励交流! 2013-12-05 21:01:49
是合理的啊,A属没有明确做28S的,自然BLAST不到

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2013-12-05 09:09:57
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三蛰

铜虫 (小有名气)



柠檬可乐星(金币+1): 谢谢参与
楼上说的对
7楼2013-12-05 10:05:44
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不叶珏

铁杆木虫 (正式写手)


★ ★
柠檬可乐星(金币+1): 谢谢参与
gyesang: 金币+1, 鼓励交流! 2013-12-05 21:01:56
就是说 NCBI 上暂时没有与你序列相似的序列
没人提交相关序列 你自然找不到match了
9楼2013-12-05 10:32:05
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柠檬可乐星

新虫 (小有名气)


如果真是这样 反倒能放心了 多谢各位指点
11楼2013-12-05 17:59:37
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萝卜青菜81

新虫 (初入文坛)



柠檬可乐星(金币+1): 谢谢参与
我觉得可能就是你说的,你这个种的即可能没有测基因组,也没有测28S和ITS,所以数据库里没有相关序列,导致比对不上。我目前也遇到了相似的问题,真的是奇怪了。我300bp的序列,后面50bp比对上某个物种,前面的250bp什么也没有比对上,引物还是特异性的,如果非特异性扩增到未注释的序列,那也不应该有后面50bp能比对上,头都疼了。
13楼2018-04-15 00:08:32
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萝卜青菜81

新虫 (初入文坛)


我觉得可能就是你说的,你这个种的即可能没有测基因组,也没有测28S和ITS,所以数据库里没有相关序列,导致比对不上。我目前也遇到了相似的问题,真的是奇怪了。我300bp的序列,后面50bp比对上某个物种,前面的250bp什么也没有比对上,引物还是特异性的,如果非特异性扩增到未注释的序列,那也不应该有后面50bp能比对上,头都疼了。
14楼2018-04-15 00:09:44
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neu2343楼
2013-12-05 09:34   回复  
柠檬可乐星(金币+1): 谢谢参与
2013-12-05 09:58   回复  
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haixiawu6楼
2013-12-05 10:00   回复  
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wlxiao8楼
2013-12-05 10:10   回复  
柠檬可乐星(金币+1): 谢谢参与
2013-12-05 10:53   回复  
柠檬可乐星(金币+1): 谢谢参与
1 [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2013-12-06 23:17   回复  
柠檬可乐星(金币+1): 谢谢参与
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