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1楼 2013-12-02 10:30:38

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cicelyzh

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SDS-PAGE下面本来分辨率就会变差，你的胶算不错的了。你说的最下面的线应该是指示剂前沿，有小蛋白在那附近也正常。如果你想提高小蛋白的分辨率，可以用高浓度的胶或者跑梯度胶。实在不行可以跑Tricine胶。

3楼2013-12-03 02:20:16

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鬼羽帝魂

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我们实验室一般用5%的浓缩胶，12%的分离胶。不知你用的是不是，可以试试看。

4楼2013-12-03 08:58:24

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zilinweizhu

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最下面的黑带是溴酚蓝没有跑过的胶染出来的条带，或者是溴酚蓝的条带区域染色的条带，不知道你用什么染色的，我用的一种武汉麦克莱博生物公司的快染试剂背景较浅，基本上可以消下面的那条黑线

6楼2013-12-03 09:57:53

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shen_41745

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另外，你要对一下Marker，确定一下目的蛋白的大小，如果蛋白小于20KD,就要把蛋白分离胶的浓度加大至20%以上

22楼2013-12-11 19:56:04

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rice1007

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23楼2013-12-12 10:57:46

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wjswj

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这算是跑的挺清楚的了，解决方法：1.加大分离胶浓度；2.减少电泳时间；不知道你的目的产物有多大，通常不会看到那么小的片段吧。就图上看倒数第二个样本与其他样本有较明显区别。

金币是赌出来的

2楼2013-12-02 16:23:23

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从图上看，从右到左第三泳道有一小蛋白带，是其它泳道没有的，可以做一个westernblot看看

5楼2013-12-03 09:13:00

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我说楼主，你跑这蛋白胶的目的是什么啊？实验目的都不明确，怎么看啊？

7楼2013-12-03 20:37:19

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我也有过你这样的情况，别的都很好，就是在最下面有一条那样的条带，怎么脱色都脱不下去。我也一直没哟好的办法，但是很奇怪的是，这个效果时有时没有，你看看从新弄个上扬缓冲液，和分离胶的试剂从新配一下。

8楼2013-12-04 15:52:32

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2楼: Originally posted by wjswj at 2013-12-02 16:23:23
这算是跑的挺清楚的了，解决方法：1.加大分离胶浓度；2.减少电泳时间；不知道你的目的产物有多大，通常不会看到那么小的片段吧。就图上看倒数第二个样本与其他样本有较明显区别。

因为跑的是水稻全蛋白，最下面的条带是第二大含量的存储蛋白，所以还是蛮重要的，不知道为什么，老是跟那个长长的线分不开

9楼2013-12-05 10:25:25

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3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-12-03 02:20:16
SDS-PAGE下面本来分辨率就会变差，你的胶算不错的了。你说的最下面的线应该是指示剂前沿，有小蛋白在那附近也正常。如果你想提高小蛋白的分辨率，可以用高浓度的胶或者跑梯度胶。实在不行可以跑Tricine胶。

嗯，我也打算用tricine试试，谢谢啦