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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白SDS-PAGE 下面 老是跑不出来，请各位前辈帮我看看
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新虫 (小有名气)
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4楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2013-12-03 08:58:24
我们实验室一般用5%的浓缩胶，12%的分离胶。不知你用的是不是，可以试试看。

我就是用的这个浓度的
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11楼2013-12-05 10:26:27
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新虫 (小有名气)
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5楼: Originally posted by lm2570 at 2013-12-03 09:13:00
从图上看，从右到左第三泳道有一小蛋白带，是其它泳道没有的，可以做一个westernblot看看

嗯，这个是我筛出的突变体
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12楼2013-12-05 10:26:59
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新虫 (小有名气)
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6楼: Originally posted by zilinweizhu at 2013-12-03 09:57:53
最下面的黑带是溴酚蓝没有跑过的胶染出来的条带，或者是溴酚蓝的条带区域染色的条带，不知道你用什么染色的，我用的一种武汉麦克莱博生物公司的快染试剂背景较浅，基本上可以消下面的那条黑线

我试过在样品里不加溴酚蓝，但是那条条带依旧存在，不知道为什么
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13楼2013-12-05 10:27:43
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新虫 (小有名气)
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7楼: Originally posted by shen_41745 at 2013-12-03 20:37:19
我说楼主，你跑这蛋白胶的目的是什么啊？实验目的都不明确，怎么看啊？

目地很明确啊，这些都是突变体材料，就是找蛋白不一样的，右边第二个就是筛出的
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14楼2013-12-05 10:28:28
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新虫 (小有名气)
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8楼: Originally posted by makubex83 at 2013-12-04 15:52:32
我也有过你这样的情况，别的都很好，就是在最下面有一条那样的条带，怎么脱色都脱不下去。 我也一直没哟好的办法，但是很奇怪的是，这个效果时有时没有，你看看从新弄个上扬缓冲液，和分离胶的试剂从新配一下。

嗯，我是有时候能分的比较开，有时候分不开，也不知道为什么，也许是胶浓度的细微变化，或者是时间长短
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15楼2013-12-05 10:29:32
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makubex83

至尊木虫 (知名作家)
引用回帖:
15楼: Originally posted by msms at 2013-12-05 10:29:32
嗯，我是有时候能分的比较开，有时候分不开，也不知道为什么，也许是胶浓度的细微变化，或者是时间长短...

我个人感觉和陪胶的试剂有点关系，其次就是上扬缓冲液了，别的问题我真的是想不出来了
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16楼2013-12-05 16:10:32
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新虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by makubex83 at 2013-12-05 16:10:32
我个人感觉和陪胶的试剂有点关系，其次就是上扬缓冲液了，别的问题我真的是想不出来了...

好吧，有发现再交流哈
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17楼2013-12-05 22:10:22
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by msms at 2013-12-05 10:26:27
我就是用的这个浓度的...

好吧
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18楼2013-12-06 15:18:14
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Allen206

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-12-08 20:41:01
这有什么好着急的，样品里面主要蛋白在20K,10K或者更小，加大胶浓度或者小分子电泳就好啦，12%胶二三十K的才最好看，
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不想说什么，，，，
19楼2013-12-06 16:47:15
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lymic07

禁虫 (初入文坛)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-08 20:41:20
本帖内容被屏蔽
20楼2013-12-08 18:30:08
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