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msms

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白SDS-PAGE 下面 老是跑不出来，请各位前辈帮我看看已有4人参与

最下面的条带有点弥散，最郁闷的是最下面有一条长长的横线，不知道是什么，貌似还有条带在里面，分不出来，请各位前辈帮我看看，能怎么解决，我都急死了。
蛋白SDS-PAGE 下面 老是跑不出来，请各位前辈帮我看看
wy2013-11-27 20hr 07min_副本.jpg
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1楼2013-12-02 10:30:38
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-08 20:40:24
我们实验室一般用5%的浓缩胶，12%的分离胶。不知你用的是不是，可以试试看。
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4楼2013-12-03 08:58:24
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wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-02 16:33:19
这算是跑的挺清楚的了，解决方法：1.加大分离胶浓度；2.减少电泳时间；不知道你的目的产物有多大，通常不会看到那么小的片段吧。就图上看倒数第二个样本与其他样本有较明显区别。
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金币是赌出来的
2楼2013-12-02 16:23:23
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-08 20:40:17
SDS-PAGE下面本来分辨率就会变差，你的胶算不错的了。你说的最下面的线应该是指示剂前沿，有小蛋白在那附近也正常。如果你想提高小蛋白的分辨率，可以用高浓度的胶或者跑梯度胶。实在不行可以跑Tricine胶。
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3楼2013-12-03 02:20:16
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lm2570

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-08 20:40:35
从图上看，从右到左第三泳道有一小蛋白带，是其它泳道没有的，可以做一个westernblot看看
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5楼2013-12-03 09:13:00
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