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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 怎么根据SDS-PAGE图估算蛋白浓度 求指导
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yuhan131481

铁虫 (小有名气)

[求助] 怎么根据SDS-PAGE图估算蛋白浓度 求指导

marker 2μL    样品上了12μL   总蛋白样浓缩到250μ左右   求指导

20130412005.jpg
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1楼2013-04-15 11:12:54
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782478106

铁虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 应助指数-1, 非应助 2013-04-16 07:17:19
这个做的结果不太好哦
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时刻都要努力，为了下一秒
2楼2013-04-15 12:39:27
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yakir

银虫 (小有名气)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 应助指数-1, 谢谢参与，不过回帖更倾向于交流，而不是应助，没有回答楼主问题 2013-04-16 07:20:37
你这不仅是marker歪了，整块胶都歪了，胶重新弄块吧，或者直接photoshop把图转一下也行啊。
和样品本身没多大关系，要不就是内槽的电泳液漏了，加紧一点。
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一步一步！
3楼2013-04-15 16:18:31
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
为什么要跑胶估算浓度，直接做蛋白定量不行吗？
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4楼2013-04-16 04:10:10
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wizardfan

至尊木虫 (著名写手)

优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
定量一般都需要有某种计量方法，比如做MS的intensity，或者透光度等。SDS-PAGE都是用来分离，而不是定量的
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5楼2013-04-16 07:20:07
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dlzhkkk

捐助贵宾 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
根据SDS-PAGE也可以大体估计一下，有的Marker说明书上提供每条带的含量是多少，如果没有的话，你可以加一个比较稳定的已经定量的蛋白如BSA等，然后比较条带的明亮程度进行估计，之后根据你的上样量来确定样品的蛋白量。
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6楼2013-04-16 09:15:57
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dlzhkkk

捐助贵宾 (职业作家)

【答案】应助回帖

当然，你还可以用软件对PAGE结果进行计算。
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7楼2013-04-16 09:17:19
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shsDerek

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以根据marker的指示带来定量，你的marker中粉红色的带应该是指示带，确定他的量，就可以估计出样品的量，感觉你的蛋白样没有多少杂带，可以直接检测其浓度。仅供参考
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8楼2013-04-17 07:41:36
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DBWJ

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
Maker一般都会有浓度，你可以根据你的上样体积计算Maker的蛋白量。然后找软件计算一下你样品条带与Maker条带亮度的差异倍数就能大概估算出你蛋白的浓度了，希望对你有帮助。
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9楼2013-04-17 13:27:57
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