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笑笑-

铁虫 (初入文坛)

[求助] SDS-page电泳蛋白样的处理

发酵液里还有些杂蛋白需去除，老板要求跑电泳，知道杂质大致分子量后好选超滤膜，用过硫酸铵沉淀杂蛋白效果不好，请教一下还有什么常用的方法，像一些有机溶剂沉淀啊，可是沉淀的溶剂溶度多少为好
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加油
1楼 2012-10-12 20:07:43
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青豆同学

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
哦 就是说要跑电泳  但是蛋白浓度有点低  是吧？可以试一下PEG
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谢谢你给我信心与力量，我会努力！
2楼2012-10-12 20:18:46
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zhanglily9

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-10-22 13:37:39
这是做蛋白质电泳常见的问题。我一般是加入四倍体积的冷丙酮，-20冰箱中放置过夜，离心，取沉淀，加入上样BUFFER溶解，电泳。
PEG和硫酸铵都会使蛋白条带变宽，本来蛋白量就不大，加入这两种物质后，蛋白条带就不会太清晰。
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3楼2012-10-19 09:34:40
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Pooooppy

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我用的无水乙醇沉淀，你可以尝试一下做不同梯度得到最优
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4楼2012-10-22 09:40:57
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笑笑-

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhanglily9 at 2012-10-19 09:34:40
这是做蛋白质电泳常见的问题。我一般是加入四倍体积的冷丙酮，-20冰箱中放置过夜，离心，取沉淀，加入上样BUFFER溶解，电泳。
PEG和硫酸铵都会使蛋白条带变宽，本来蛋白量就不大，加入这两种物质后，蛋白条带就不会 ...

加入丙酮，同时会沉降下色素等物质，跑电泳有干扰吧？
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加油
5楼2012-10-25 13:21:38
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