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h206206206

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】SDS-PAGE煮沸样品 已有5人参与

弱弱的问下跑SDS-PAGE胶时什么情况下必须沸水煮样,什么情况下不需要或者不能煮样,另外煮样的目的是什么?想系统了解下,请各位朋友好好指点下,敬谢!
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夜龙舞

金虫 (小有名气)

★
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跑菌体蛋白的时候需要煮沸,SDS可以使菌体破裂释放蛋白,loading buffer与蛋白结合。
2楼2010-08-18 08:51:57
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stella0xhx

新虫 (小有名气)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
SDS-PAGE胶电泳前,样品貌似都需要处理的哈,有还原型和非还原型之分,加入SDS
煮样,让蛋白质构型解离,电荷被中和,形成SDS与蛋白相结合的分子,根据分子量大小来分离蛋白质,这个需要沸水煮后离心上样的。
3楼2010-08-18 08:52:12
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烟大考研

金虫 (正式写手)

★
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还原样品一般得煮沸,有亚基的还得多煮几分钟,如果蛋白及其容易降解的那就另当别论了,易降解蛋白一般不敢煮,跑非还原的我们没煮过
心信其可行,则移山填海之难,终有成功之日;心信其不可行,则反掌折枝之易,亦无收效之期
4楼2010-08-18 09:30:09
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h206206206

金虫 (正式写手)

5楼2010-08-19 08:04:16
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banhf

新虫 (初入文坛)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
煮沸样品针对的是菌体的SDS-PAGE检测,目的是使菌体裂解,蛋白更好地释放出来以便检测,但如果检测的是提取出的某种蛋白,就不需要煮沸了
6楼2010-08-19 17:25:29
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