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【求助/交流】SDS-PAGE煮沸样品
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[交流]
【求助/交流】SDS-PAGE煮沸样品
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弱弱的问下跑SDS-PAGE胶时什么情况下必须沸水煮样,什么情况下不需要或者不能煮样,另外煮样的目的是什么?想系统了解下,请各位朋友好好指点下,敬谢!
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多一些快乐,少一些烦恼!
1楼
2010-08-18 08:35:53
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跑菌体蛋白的时候需要煮沸,SDS可以使菌体破裂释放蛋白,loading buffer与蛋白结合。
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2010-08-18 08:51:57
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专业: 生物化学
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小木虫(金币
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SDS-PAGE胶电泳前,样品貌似都需要处理的哈,有还原型和非还原型之分,加入SDS
煮样,让蛋白质构型解离,电荷被中和,形成SDS与蛋白相结合的分子,根据分子量大小来分离蛋白质,这个需要沸水煮后离心上样的。
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3楼
2010-08-18 08:52:12
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烟大考研
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小木虫(金币
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还原样品一般得煮沸,有亚基的还得多煮几分钟,如果蛋白及其容易降解的那就另当别论了,易降解蛋白一般不敢煮,跑非还原的我们没煮过
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心信其可行,则移山填海之难,终有成功之日;心信其不可行,则反掌折枝之易,亦无收效之期
4楼
2010-08-18 09:30:09
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h206206206
金虫
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2010-08-19 08:04:16
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banhf
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小木虫(金币
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煮沸样品针对的是菌体的SDS-PAGE检测,目的是使菌体裂解,蛋白更好地释放出来以便检测,但如果检测的是提取出的某种蛋白,就不需要煮沸了
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6楼
2010-08-19 17:25:29
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