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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】SDS-PAGE煮沸样品
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h206206206

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】SDS-PAGE煮沸样品 已有5人参与

弱弱的问下跑SDS-PAGE胶时什么情况下必须沸水煮样，什么情况下不需要或者不能煮样，另外煮样的目的是什么？想系统了解下，请各位朋友好好指点下，敬谢！
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多一些快乐，少一些烦恼!
1楼 2010-08-18 08:35:53
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夜龙舞

金虫 (小有名气)
★
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跑菌体蛋白的时候需要煮沸，SDS可以使菌体破裂释放蛋白，loading buffer与蛋白结合。
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2楼2010-08-18 08:51:57
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stella0xhx

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
SDS-PAGE胶电泳前，样品貌似都需要处理的哈，有还原型和非还原型之分，加入SDS
煮样，让蛋白质构型解离，电荷被中和，形成SDS与蛋白相结合的分子，根据分子量大小来分离蛋白质，这个需要沸水煮后离心上样的。
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3楼2010-08-18 08:52:12
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烟大考研

金虫 (正式写手)
★
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还原样品一般得煮沸，有亚基的还得多煮几分钟，如果蛋白及其容易降解的那就另当别论了，易降解蛋白一般不敢煮，跑非还原的我们没煮过
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心信其可行，则移山填海之难，终有成功之日；心信其不可行，则反掌折枝之易，亦无收效之期
4楼2010-08-18 09:30:09
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h206206206

金虫 (正式写手)
5楼2010-08-19 08:04:16
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banhf

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
煮沸样品针对的是菌体的SDS-PAGE检测，目的是使菌体裂解，蛋白更好地释放出来以便检测，但如果检测的是提取出的某种蛋白，就不需要煮沸了
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6楼2010-08-19 17:25:29
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