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[交流]
【求助】请问蛋白电泳的原料应该怎么处理？
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请问一下，我想测一下大豆蛋白的分子量图谱，但是样品不纯，是不是得先处理一下啊？O(∩_∩)O谢谢 [ Last edited by lovibond on 2011-10-2 at 21:54 ] |
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lovibond(金币+1):感谢交流 2011-01-12 10:17:57
lovibond(金币+1):感谢交流 2011-01-12 10:17:57
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十二烷基磺酸钠- 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)参照Laemmli方法。分离胶浓度为12%(质量分数，下同)，浓缩胶浓度为5%。 电泳前将已和样品缓冲液混合的样品煮沸5 min， 上样量为10μL，凝胶电泳于恒流下进行，在浓缩胶中电流为40mA，进入分离胶后增至80mA. 凝胶染色液用含有0.25%的考马斯亮蓝R-250，脱色用高甲醇的醋酸溶液，甲醇/冰醋酸/水的体积比为1∶1∶8。凝胶染色及脱色后，于凝胶成像系统进行成像处理。 参考文献：Laemmli, U. K. (1970). Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature, 227, 680–685. 我当时也是做大豆蛋白，现在不记得样品前处理方法了，你看一下文献有没有 |
6楼2011-01-12 10:16:55
7楼2011-01-12 10:22:48
8楼2011-01-12 13:33:26