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jia1012428

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】为什么我的sds-page全细胞总跑成这样,影响看结果,请指点。已有11人参与

为什么我的sds-page全细胞总跑成这样,影响看结果,请指点。

标准的应该像下面的才对,每条带都能看清楚。
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+1):good! 2010-11-08 19:33:28
下面的是广告的
上面的是咱们经验不是很丰富的人士做的。
多做几次,
多多分析优化条件。
青春的岁月,我们身不由己,只因这胸中燃烧的梦想!
2楼2010-11-08 16:19:31
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+1):high hand~ :tiger23: 2010-11-08 23:08:10
Maker没问题,说明胶问题不大。样品有点垂直的条纹,有点像样品没离心或者离心不彻底,点样孔堵塞的原因。
Thank-you,so-blue.
3楼2010-11-08 16:40:42
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

样品处理不好导致。
4楼2010-11-08 16:43:43
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695

木虫 (职业作家)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+2):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-11-08 23:08:18
我觉得一个可能是缓冲或上样液的盐浓度大及样品变性补充分(这个我觉得可能性不大)可能会造成这样,还有要检查你的配胶两个buffer是不是pH发生变化了
5楼2010-11-08 16:53:30
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stephenreal

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-11-08 23:08:26
大概是理解细胞的缓冲液里有什么去垢剂如triton之类没有处理,样品多的话透析一下,效果就会很好的
6楼2010-11-08 17:10:40
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stephenreal

至尊木虫 (著名写手)

另外,硫酸盐、尿素之类的因为电荷的原因,也可能造成类似于smear的现象
7楼2010-11-08 17:11:57
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jia1012428

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by jhu132llh at 2010-11-08 16:19:31:
下面的是广告的
上面的是咱们经验不是很丰富的人士做的。
多做几次,
多多分析优化条件。

请问煮过样品后一定要离心吗,我看有的书上面就是要求离心,但我都没离过,我觉得离心之后,蛋白不是沉淀了吗,那上清就什么也没有了,怕跑不出条带,不知道我这么解释对不对,请您指点,多谢!
8楼2010-11-08 20:59:32
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jia1012428

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2010-11-08 16:40:42:
Maker没问题,说明胶问题不大。样品有点垂直的条纹,有点像样品没离心或者离心不彻底,点样孔堵塞的原因。

请问煮过样品后一定要离心吗,我看有的书上面就是要求离心,但我都没离过,我觉得离心之后,蛋白不是沉淀了吗,那上清就什么也没有了,怕跑不出条带,不知道我这么解释对不对,请您指点,多谢!
9楼2010-11-08 21:00:28
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by jia1012428 at 2010-11-08 21:00:28:

请问煮过样品后一定要离心吗,我看有的书上面就是要求离心,但我都没离过,我觉得离心之后,蛋白不是沉淀了吗,那上清就什么也没有了,怕跑不出条带,不知道我这么解释对不对,请您指点,多谢!

最好离心吧。煮样后,蛋白溶解在溶液里面,不会离下来的。
Thank-you,so-blue.
10楼2010-11-08 21:22:26
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